常用蛋白质分子量标准参照物(精)

十、常用蛋白质分子量标准参照物

高分子量标准参照 中分子量标准参物 低分子量标准参照 蛋白质 肌球蛋白 β－半乳糖苷酶 磷酸化酶B 牛血清清蛋白 过氧化氢酶 醛缩酶 Mr 212 000 116 000 97 400 66 200 57 000 40 000 蛋白质 磷酸化酶B 牛血清清蛋白 谷氨酸脱氢酶 卵清蛋白 醛缩酶 碳酸酐酶 大豆胰蛋白酶抑制剂 溶菌酶 十一、层析法常用数据表及性质 （一） 离子交换纤维素

目前常用的离子交换纤维素列于下表 蛋白吸附容量 （毫克/克） DEAE－ 形状 纤维素 DE-22 DE-23 DE-32 DE-52 CM-纤维素 CM-22 CM-23 CM-32 CM-52 改良纤维性 * （微米） （毫克当量/克） （pH8.5） 12~400 1.0±0.1 1.0±0.1 1.0±0.1 1.0±0.1 0.6±0.06 0.6±0.06 1.0±0.1 1.0±0.1 溶菌酶 (pH5.0) 600 600 1,260 1,260 750 750 850 850 7S－γ球蛋白（pH5.0） 150 150 400 400 （pH8.5） 450 450 660 660 pH5.0 7.7 9.1 6.8 6.8 7.7 9.1 6.7 6.7 长度 交换当量 胰岛素牛血清清蛋白pH6.0 7.7 8.3 6.0 6.0 pH7.5 7.7 9.1 6.3 6.3 pH7.5 床体积（毫升/克） Mr 97 400 66 200 55 000 42 700 40 000 31 000 21 500 14 400 蛋白质 碳酸酐酶 大豆胰蛋白酶制剂 马心肌球蛋白 溶菌酶 肌球蛋白（F1） 肌球蛋白（F2） 肌球蛋白（F3） Mr 31 000 21 500 16 900 14 400 8 100 6 200 2 500 同上（除细粒） 18~400 微粒性（干粉） 同上（溶胀） 改良纤维性 12~400 24~63 24~63 同上（除细粒） 18~400 微粒性（干粉） 同上（溶胀） 24~63 24~63 *：英国Whatman厂的型号，原来有旧型号如DE-1，为长纤维性，长度1000微米。还有DE-11，纤维性，50～250微米，对牛血清清蛋白的吸附容量仅为130毫克/克。

（二）聚丙烯酰胺凝胶的技术数据 排阻的下限 （Mr） 1 600 3 600 4 600 10 000 30 000 60 000 100 000 150 000 200 000 300 000 分级分离的范围 （Mr） 200~2 000 500~4 000 1 000~5 000 5 000~17 000 20 000~50 000 30 000~70 000 40 000~100 000 50 000~150 000 80 000~300 000 100 000~400 000 膨胀后的床体积 （mL/g干凝胶） 3.8 5.8 8.8 12.4 14.9 19.0 19.0 24.0 34.0 40.0 膨胀所需最少时间 （室温，小时） 2~4 2~4 2~4 2~4 10~12 10~12 24 24 48 48 型号 Bio-gel-P-2 Bio-gel-P-4 Bio-gel-P-6 Bio-gel-P-10 Bio-gel-P-30 Bio-gel-P-60 Bio-gel-P-100 Bio-gel-P-150 Bio-gel-P-200 Bio-gel-P-300 注：上述各种型号的凝胶都是亲水性的多孔颗粒，在水和缓冲溶液中很容易膨胀，生产厂为Bio-Rad Laboratories,Rich-mond, California, U. S. A.

（三）琼脂糖凝胶的技术数据

（琼脂糖是琼脂内非离子型的组分，它在0 ~ 4℃，pH 4~9范围内是稳定的。） 名称、型号 凝胶内琼脂糖百分 排阻的下限（Mr） 分级分离的范围（Mr） 含量（W/W） Sagavac 10 Sagavac 8 Sagavac6 Sagavac4 Sagavac2 Bio-GelA-0.5M Bio-GelA-1.5M Bio-GelA-5M Bio-GelA-15M Bio-GelA-50M Bio-GelA-150M 10 8 6 4 2 10 8 6 4 2 1 2.5×105 7×105 2×106 15×106 150×106 0.5×105 1.5×106 5×106 15×105 50×106 150×106 1×104~2.5×105 2.5×104~7×105 5×104~2×106 2×105~15×106 5×105~15×107 <1×104~2.5×106 <1×104~1.5×106 1×104~5×106 4×104~15×106 1×105~50×106 1×106~150×106 Bio-Rad Laboratories, California,U.S.A. Seravac Laboratories, Maidenhead, England 生产厂商 （四）凝胶过滤层析介质的技术数据 凝胶过滤介质名称 分离范围 颗粒 大小 （μm） Superdex 30 <10000 24~44 24~44 24~44 20~40 20~40 25~75 25~75 25~75 25~75 平均90 平均90 60~200 45~165 45~165 60~200 60000~20×105 10000~4×106 45~165 45~165 肽类、寡糖、小蛋白等 重组蛋白、细胞色素 单抗、大蛋白 蛋白、肽类、多糖、核酸 蛋白、肽类、寡糖、多糖 肽类、小蛋白 蛋白，如清蛋白 蛋白、抗体 3~11 3~11 0.2 0.1 2~12 4~9 4~9 3~13 3~13 4~9 0.004 0.008 0.02 0.005 0.012 0.02 0.1 250 10 11.5 14 15 26 30 0.2 20~39 300 特性/应用 pH稳定性工作 3~12 3~12 3~12 3~12 3~12 3~11 0.2 20~39 0.3 0.3 0.3 0.4 0.7 0.2 20~39 耐压最 快 流 速 （cm/h） 100 100 100 30 30 20~39 （Mpa） Superdex 75 3000~70000 Superdex200 0 10000~600000 Superose 6 Superose 12 Sephacryl S-100 HR Sephacryl S-200 HR Sephacryl S-300 HR Sephacryl S-400 HR Sepharose 6 Fast Flow Sepharose 4 Fast Flow Sepharose 2B Sepharose 4B Sepharose 6B Sepharose CL-2B Sepharose CL-4B Sepharose CL-6B

5000~5×106 1000~300000 1000~ 100000 5000~250000 10000~1.5×106 20000~8×106 10000~4×106 60000~20×106 70000~40×106 60000~20×106 10000~4×106 70000~40×106 多糖、具延伸结构的大分 3~11 子如蛋白多糖、脂质体 巨大分子 巨大分子如重组乙型肝 炎表面抗原 蛋白、大分子复合物、病毒、不对称分子如核酸和多糖（蛋白多糖） 蛋白、多糖 蛋白、多糖 蛋白、大分子复合物、病毒、不对称分子如核酸和多糖（蛋白多糖） 蛋白、多糖 蛋白、多糖 2~12 凝胶过滤介质名称 SephadexG-10 SephadexG-15 SephadexG-25 Coarse SephadexG-25Medium SephadexG-25 Fine SephadexG-25 Superfine SephadexG-50 Coarse SephadexG-50 Medium SephadexG-50 Fine SephadexG-50 Superfine SephadexG-75 SephadexG-75 Superfine SephadexG-100 SephadexG-100 Superfine SephadexG-150 SephadexG-150 Superfine SephadexG-200 SephadexG-200 Superfine SephadexLH20 ( 嗜脂性 ) 分离 范围 <700 <1500 1000~5000 1000~5 000 1000~5000 1000~5000 1500~30000 1500~30000 1500~30000 1500~30000 3000~80000 3000~70000 4000~1.5×105 4000~1×105 5000~3×105 5000~1.5×105 5000~6×105 5000~2.5×105 100~ 4 000 颗粒 大小 （μm） 干粉40~120 干粉40~120 干粉100~300 干粉50~150 干粉20~80 干粉10~40 干粉100~300 干粉50~150 干粉20~80 干粉10~40 干粉40~120 干粉10~40 干粉40~120 干粉10~40 干粉40~120 干粉10~40 干粉40~120 干粉10~40 干粉 25~106 特性/应用 pH 稳定性 工作 干凝胶 溶胀体积 （mL/g） 2~3 2.5~3.5 4~6 4~6 溶胀最少 平衡时间（h） 室温 3 3 6 6 6 6 6 6 6 6 24 24 48 48 72 72 72 72 5 5 5 5 5 5 3 3 2 2 2 2 2 2 2 2 1 沸水 1 最快 流速 (cm/h) 2~5 2~5 2~5 2~5 2~5 2~5 2~5 2~5 2~5 2~5 72 16 47 11 21 5.6 11 2.8 脱盐及交换缓冲液用 脱盐及交换缓冲液用 脱盐及交换缓冲液用 脱盐及交换缓冲液用 小分子蛋白质分离 小分子蛋白质分离 小分子蛋白质分离 小分子蛋白质分离 中等蛋白质分离 中等蛋白质分离 中等蛋白质分离 中等蛋白质分离 稍大蛋白质分离 稍大蛋白质分离 较大蛋白质分离 较大蛋白质分离 2~13 2~13 2~13 2~13 2~10 2~10 2~10 2~10 2~10 2~10 2~10 2~10 2~10 2~10 2~10 2~10 2~13 2~13 4~6 4~6 9~11 9~11 9~11 9~11 12~15 12~15 15~20 15~20 20~30 18~22 30~40 20~25 特别为使用有机溶剂而设计。适合分离脂类、胆固醇、脂肪酸、激素、维生素及其他小生物分子。此分离范围指以酒精为溶剂的分离