开题报告-闫梅

学号：2010229213

本科生毕业论文

开题报告

题目：富硒大蒜中硒核酸和硒多糖的提取及硒含量的测定

院 （系） 农学与生命科学学院 专 业 班 级 生物科学2010级 学 生 姓 名 闫梅 指导教师（职称） 马瑛（助教） 提 交 时 间 二○一三年九月

安康学院农学与生命科学学院（系）生物科学专业 2013届本科生

毕业论文开题报告

姓名 论文题目 选题的意义: 大蒜(Allium sativum L.)，属百合科葱属，世界各国均有分布。大蒜被认为是日常最佳保健食品之一，常食之具有祛湿抗毒、健脾强身的功效。.大蒜是烹调美味佳肴过程中的调味品，也是上好的营养品，更是极佳的绿色天然药品，有研显示大蒜的营养价值甚至超过了人参。 闫梅 学号 2010229213 富硒大蒜中硒核酸和硒多糖的提取及硒含量的测定 大蒜含有200多种有益于身体健康的物质，除蛋白质、维生素E、C及钙、铁、硒等微量元素外，及具杀菌力的大蒜素。硒元素是人体内必需的微量元素之一，是红细胞中谷胱甘肽过氧化物酶等的必要成分，并且人类的多种癌症都与人体缺硒有关。硒的生物功能主要是抗氧化且以硒蛋白、硒酶形式发挥作用，并以硒代半胱氨酸(Sec)的形式存在于蛋白质中作为硒酶的活性中心发挥作用。大蒜对硒具有很强的生物富集作用，大蒜与硒的作用一致，有协同增效作用。美国抗癌研究协会的试验表明，富硒大蒜的抗癌效果比普通大蒜高150—300倍。大蒜具有抗癌、抗疲劳、抗衰老、保护心血管、改善代谢、杀菌作用等诸多功效。而大蒜中的含硫化合物能促进肠产生一种酶或称为蒜臭素的物质，通过增强机体免疫能力，阻断脂质过氧化形成及抗突变等多条途径，消除在肠里的物质引发肠道肿瘤的危险使大蒜具有抗癌作用。大蒜里的某些成份，有类似维生素E与维生素C的抗氧化，防衰老特性。抗疲劳作用猪肉富含维生素B1的食物之一，而维生素B1与大蒜所含有的大蒜素结合在一起，能很好的发挥消除疲劳、恢复体力的作用。 而富硒大蒜中的硒元素具有是体内的必须营养元素、抗癌作用、免疫作用、抗辐射损伤作用、预防心血管疾病、解毒功能，对农作物有抗逆境作用、促进生长。硒与大蒜二者功能相辅，使富硒大蒜更具有研究价值。 本实验探究富硒大蒜中硒的赋存形态及分布，为有机硒功能食品或药物的研究提供科学依据。 研究综述： 1、硒在大蒜体内的富集及生物学功效 大蒜除具有丰富的营养价值外, 还被认为具有较强的防癌抗癌作用, 这与大蒜内硒元素含量高有关。研究表明大蒜对硒具有强的吸收作用, 其吸硒量随着所加硒浓度的增加而逐渐提高, 且大蒜具有摄取无机硒并转化为有机硒的能力，转化能力很强，最高可达78.24%。硒存在于含硫元素的化合物中, 如蛋白质、多糖、核糖核酸以及一些其它有机化合物, 包括氨基酸等, 不论在植物, 还是细菌中, 已发现的Se- RNA 都是转移核糖核酸, 且已鉴定出含硒结构为5- 甲胺基甲基- 2- 硒代尿嘧啶，据探究得大蒜中存在硒多糖。在生物大分子中, 含硒蛋白含量最高,这是由于大蒜蛋白中含硫氨基酸较高的原因。硒在生物中多以硒代氨基酸形式存在, 并结合于蛋白质中。 T apple等发现, 硒代氨基酸对水溶液中氨基酸和酶有辐射保护作用; 含硒蛋白能抑制不饱和脂肪酸的氧化或过氧化。研究结果表明大蒜含较高的含硒蛋白, 有利于大蒜的抗氧化作用, 保护膜系统的结构和功能。硒具有抗氧化、提高畜禽的免疫能力、增强动物繁殖力以及参与机体内产热代谢、提高抗应激能力等功能。此外，硒是体内的必须营养元素、抗癌作用、免疫作用、抗辐射损伤作用、预防心血管疾病、解毒功能，对农作物有抗逆境作用、促进生长。 2、大蒜硒多糖的研究进展 研究显示大蒜硒多糖具有: a类菊糖的作用；b增强免疫力作用；c对肝损伤有良好的保护作用；d对实验性小鼠病毒性心肌炎具治疗作用；e大蒜硒多糖对紫外线诱发的晶状体损伤的抑制；f大蒜多糖可作为乳酸菌发酵的碳源；g抗氧化和抗病毒作用。 并且研究表明，硒多糖的高抗氧化性使大蒜多糖具有清除超氧阴离子自由基和羟基自由基的能力，且在较高浓度下强于大蒜素，而大蒜素的还原能力则强于大蒜多糖。 3、大蒜硒核酸的研究进展 发现核酸中存在着硒，硒和硫、氧同属于元素周期表中第六主族元素，在一定条件下硒可取代硫形成硒代化合物。植物中发现的se－RNA确切形式是t－RNA,5－甲胺基－2－硒代尿嘧啶。但未发现DNA或RNA直接与Se相连的。 研究内容： 1.大蒜鳞茎中硒总量的测定； 用高效液相色谱法检测硒的总含量 2.无机硒含量、有机硒含量的测定； 采用氢化物原子荧光法测定透析后富硒大蒜后硒的含量，得到富硒大蒜有机硒含量；用总的硒含量减去有机硒含量即材料中的无机硒含量。 3.硒核酸的提取及硒含量的测定； 稀碱法提取RNA, 低温放置过夜, 所得RNA沉淀用少量95%乙醇洗涤, 离心收集沉淀, 并用少量重蒸水和1至2滴1mol/ L氨水溶解沉淀, 加入等体积氯仿、辛醇( 24：1) 振荡, 除去水相和有机相之间的变性蛋白, 收集水相, 定容到100mL, 测定RNA中硒含量。 CTAB法提取核算DNA,都用氢化物原子荧光法测定硒含量。 4.硒多糖的提取及硒含量的测定 采用喷雾干燥法提取大蒜多糖，采用氢化物原子荧光法测定硒含量 完成论文的条件及拟采用的研究方法和技术路线（途径）： 1. 查阅文献资料：主要查阅有关针对大蒜的核酸和多糖的提取研究结果，通过对前人探索结果的分析。查阅硒在生物体的分布，及相关功能和检测方法。 技术路线： 1．考察当地特产 （富硒的大蒜） 6. 大蒜的硒核酸 和硒多糖的提取 5．设计具体的实验方案 2．查阅相关文献 3．初步制定适合的研究方案 4．了解实验所用仪器，试剂，购置实验所用物品 7．提取大蒜中硒核酸和硒多糖的纯度测定 8．大蒜中硒核酸和硒多糖的硒含量的测定 前期准备情况: 1、查阅关于富硒大蒜的用途及检测的文献。