2020学年高中生物专题1基因工程1DNA重组技术的基本工具学案新人教版选修3

C．遗传密码的破译为基因的分离和合成提供了理论依据 D．基因工程必须在同物种间进行 答案：D

2．下列有关下图所示的黏性末端的说法，错误的是( )

A．甲、乙、丙黏性末端分别是由不同的限制酶切割产生的

B．甲、乙具有相同的黏性末端，可形成重组DNA分子，但甲、丙之间不能 C．DNA连接酶的作用位点是b处

D．切割产生甲的限制酶不能识别由甲、乙黏性末端形成的重组DNA分子片段 解析：选C。据图可知，切割形成甲、乙、丙黏性末端的限制酶识别序列与切割位点分别是—GAATTC—(在G与A之间切割)、—CAATTG—(在C与A之间切割)、—CTTAAG—(在C与T之间切割)，即甲、乙、丙是由不同的限制酶切割产生的，A正确。甲、乙的黏性末端互补，所以甲、乙可以形成重组DNA分子；甲、丙的黏性末端不互补，所以甲、丙无法形成重组DNA分子，B正确。DNA连接酶可以恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键，—CAATTC—而b处是氢键，C错误。甲、乙黏性末端形成的重组DNA分子片段为，其中没有

—GTTAAG—切割产生甲的限制酶的识别序列及酶切位点，所以切割产生甲的限制酶不能识别由甲、乙黏性末端形成的重组DNA分子片段，D正确。

3．下图所示为DNA分子在不同酶的作用下所发生的变化，图中依次表示限制性核酸内切酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、解旋酶作用的正确顺序是( )

A．①②③④ C．①④②③

B．①②④③ D．①④③②

解析：选C。图示中①是酶切割DNA分子双链产生黏性末端的过程，用到的酶是限制性核酸内切酶，②是黏性末端连接的过程，用到的酶是DNA连接酶，③是DNA分子解旋的过程，要用解旋酶，④是DNA分子复制时子链的形成过程，需要DNA聚合酶。

4．质粒是基因工程中最常用的载体，其主要特点是( )

①能自主复制 ②不能自主复制 ③结构简单 ④是蛋白质 ⑤是环状RNA ⑥是环状DNA ⑦能“友好”地“借居”

A．①③⑤⑦ C．①③⑥⑦

B．①④⑥ D．②③⑥⑦

解析：选C。质粒存在于细菌和酵母菌等微生物中，是一种很小的、独立于拟核之外的环状DNA分子，上面有标记基因，便于在受体细胞中检测。质粒在受体细胞中能“友好”地“借居”，并能随受体细胞DNA的复制而复制，能进行目的基因的扩增和表达。

5．(2019·衡水高二检测)一环状DNA分子，设其长度为1，限制酶A在其上的切点位于0.0处；限制酶B在其上的切点位于0.3处；限制酶C的切点未知，但C单独切或与A或与B同时切的结果如下表，请确定C在该环状DNA分子上的切点应位于图中的哪处( )

C单独切 C与A同时切 C与B同时切 长度为0.8和0.2的两个片段 长度为2个0.2和1个0.6的片段 长度为2个0.1和1个0.8的片段

A．0.2和0.4处 C．0.5和0.7处

B．0.4和0.6处 D．0.6和0.9处

解析：选A。据图表信息可知：限制酶C单独切割环状DNA分子，获得长度为0.8和0.2的两个片段，可推知限制酶C有2个切割位点。限制酶A只有1个切割位点，且位于0.0处，又知限制酶C与限制酶A同时切割时，获得2个0.2和1个0.6的片段，因此以限制酶A切割点向左或向右推测，可得知限制酶C的切割位点可能为0.2、0.4或0.6、0.8处。再根据限制酶C与限制酶B同时切割时，获得2个0.1和1个0.8片段，可推知限制酶C的切割位点可能为0.1、0.2或0.4、0.5处。综上分析，只有0.2和0.4两处与之前推测相吻合，选项A正确。

6．(2019·河北巨鹿高二期中)下图表示某种质粒和人的胰岛素基因，其中a表示标记基因，b表示胰岛素基因，E1表示某限制酶的酶切位点，现用该种限制酶分别切割质粒和胰岛素基因，后用DNA连接酶连接切割后的质粒和胰岛素基因，下列选项中不可能出现的是( )

答案：C

7．基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。根据下图判断下列操作正确的是( )

A．目的基因和质粒均用限制酶Ⅱ切割 B．目的基因和质粒均用限制酶Ⅰ切割

C．质粒用限制酶Ⅱ切割，目的基因用限制酶Ⅰ切割 D．质粒用限制酶Ⅰ切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割

解析：选D。解此题要明确目的基因要切下，质粒只要切开。限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—，单独使用时可以把目的基因和质粒都切断；限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，只能把它们切开，单独使用时不能切断，所以目的基因用限制酶Ⅱ切割，质粒用限制酶Ⅰ切割。用限制酶Ⅰ切割质粒时破坏了GeneⅡ，所以只能用GeneⅠ作为标记基因。

8．(2019·江苏扬州中学质量检测)基因工程利用某目的基因(图甲)和P1噬菌体载体(图乙)构建重组DNA。限制性核酸内切酶BglⅡ、EcoRⅠ和Sau3AⅠ的酶切位点分别如图所示。下列分析错误的是( )

A．构建重组DNA时，可用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因所在片段和P1噬菌体载体 B．构建重组DNA时，可用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因所在片段和P1噬菌体载体 C．图乙中的P1噬菌体载体只用EcoRⅠ切割后，含有两个游离的磷酸基团

D．用EcoRⅠ切割目的基因所在片段和P1噬菌体载体，再用DNA连接酶连接，只能产生一种重组DNA

解析：选D。用Bgl Ⅱ和Sau3A Ⅰ切割目的基因和P1噬菌体载体会形成相同的黏性末端，因此它们可构成重组DNA，A正确；由于Sau3AⅠ的切割位点在EcoRⅠ的两个酶切位点之间，因此，用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌体载体会形成相同的黏性末端，因此它们可构成重组DNA，B正确；P1噬菌体载体为环状DNA，其上只含有一个EcoRⅠ的酶切位点，因此用EcoRⅠ切割后，该环状DNA分子变为双链DNA分子，因每条链各含有一个游离的磷酸基团，故切割后含有两个游离的磷酸基团，C正确；由图甲可知，用EcoRⅠ切割

目的基因所在片段和P1噬菌体后形成的黏性末端相同，可任意连接，不止产生一种重组DNA，D错误。

二、多项选择题

9．某线性DNA分子含有3 000个碱基对(bp)，先用限制酶a切割，再把得到的产物用限制酶b切割，得到的DNA片段大小如下表。限制酶a和b的识别序列和切割位点如图所示。下列有关说法正确的是( )

a酶切割产物(bp) 1 600；1 100；300 b酶再次切割产物(bp) 800；300

A．在该DNA分子中，a酶与b酶的识别序列都是2个 B．a酶与b酶切出的黏性末端不能相互连接 C．a酶与b酶切断的化学键不同

D．用这两种酶和DNA连接酶对该DNA分子进行反复切割、连接操作，若干循环后，—AGATCC—

序列会明显增多

—TCTAGG—

解析：选AD。根据题图分析可知在该DNA分子中，a酶与b酶的识别序列都是2个，A正确；图中显示两个酶的识别序列不同，但是切割后露出的黏性末端相同，a酶与b酶切出的黏性末端可以相互连接，B错误；a酶与b酶切断的化学键都是磷酸二酯键，C错误；a—AGATCC—

酶和b酶切割后形成的黏性末端相同，在DNA连接酶的作用下可连接形成。所以

—TCTAGG—用这两种酶和DNA连接酶对该DNA分子进行反复切割、连接操作，若干循环后，所得DNA—AGATCC—分子中序列会明显增多，D正确。

—TCTAGG—

10．(2019·扬州高二模拟)下图为某种质粒的简图，小箭头所指分别为限制酶EcoRⅠ、

BamHⅠ的酶切位点，P为转录的启动部位。已知目的基因的两端有EcoRⅠ、BamHⅠ的酶切位

点，受体细胞为无任何抗药性的原核细胞。下列叙述正确的是( )

A．将含有目的基因的DNA与质粒分别用EcoRⅠ酶切，在DNA连接酶的作用下，由两个