微生物期末试题

23：答：常用测定微生物生长的方法有：1)称干重法。可用离心法或过滤法测定。优点：可适用于一切微生物，缺点：无法区别死菌和活菌。2)比浊法。原理：由于微生物在液体培养时，原生质的增加导致混浊度的增加，可用分光光度计测定。优点：比较准确。3)测含氮量，大多数微生物的含氮量占干重的比例较一致，根据含氮量再乘以6.25即可测得其粗蛋白的含量。4)血球计数板法。优点：简便、快速、直观。缺点：结果包括死菌和活菌。5)液体稀释法。对未知菌样作连续的10倍系列稀释，经培养后，记录每个稀释度出现生长的试管数，然后查MPN表，再根据样品的稀释倍数就可计算其中的活菌含量。优点：可计算活菌数，较准确。缺点：比较繁琐。6)平板菌落计数法。取一定体积的稀释菌液涂布在合适的固体培养基，经培养后计算原菌液的含菌数。优点，可以获得活菌的信息。缺点：操作繁琐，需要培养一定时间才能获得，测定结果受多种因素的影响。

24：答：诱变育种的一般程序如下：出发菌株----菌种纯化(出发菌株性能测定)----制备斜面孢子----制备单孢子悬液(悬液进行活菌计数)----诱变剂处理(存活菌数的测定并计算存活率)----平板分离(测定变异率)----挑取变异菌落并移植至斜面上----初筛(初筛数据分析，生产性状的粗测)----斜面传代----复筛(复筛数据分析，精确测定生产性状)----变异菌株(菌株参数分析)----小型或中型投产试验----大型投产试验。

诱变育种应把握的主要原则有以下几点：1)选择简便有效的诱变剂。在选用理化因素作诱变剂时，在同样效果下，应选用最简便的因素；在同样简便的条件下，应选用最高效的因素。2)挑选优良的出发菌株。最好采用生产上已发生自变的菌株，选用对诱变剂敏感的菌株，选取有利于进一步研究或应用性状的菌株。4)处理单细胞或孢子悬液。单细胞悬液应均匀而分散，孢子、芽孢等应稍加萌发。5)选用合适的诱变剂量。一般正变较多出现在低剂量中，负变较多地出现在高剂量中。6)选用高效的筛选方法。

25、答：包括无性繁殖和有性繁殖两大类：1)无性繁殖：芽殖：主要的无性繁殖方式，成熟细胞长出一个小芽，到一定程度后脱离母体继续长成新个体；裂殖：少数酵母菌可以象细菌一样借细胞横割分裂而繁殖，例如裂殖酵母(Schizosaccharomyces)。产无性孢子：产节孢子：如地霉属(Geotricum)等，产掷孢子如掷孢酵母属 (Sporobolomyces)等；产厚垣孢子如白假丝酵母(Candida albicans)等。2)有性繁殖：酵母菌以形成子囊和子囊孢子的形式进行有性繁殖。 Saccharomyces cerevisiae的生活史如右图所示。

26、答：呼吸是一种最普遍和最重要的生物氧化方式，其特点是底物按常规方式脱氢后，质子经完整的呼吸链传递，有氧条件下以分子氧作质子的最终受体产生水和释放能量ATP，或无氧条件下以含氧化合物作质子的最终受体形成还原性化合物、水和释放能量。

呼吸链是指位于原核生物细胞膜上或真核生物线粒体膜上的由一系列氧化还原势不同的氢传递体或电子传递体组成的一组链状传递顺序，它能把氢或电子从低氧化还原势的化合物传递给高氧化还原势的分子氧或其他无机、有机氧化物，并使它们还原。在氢或电子的传递过程中，通过与氧化磷酸化反应发生偶联就可产生ATP形式的能量。呼吸链的酶系是定向有序的，又是不对称地排列在真核微生物的线粒体内膜上，或排列在原核微生物的细胞质膜上。 以下几种组成呼吸链的氢或电子载体最为重要：烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD）和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADP）；黄素腺嘌呤二核苷酸（FAD）和黄素单核苷酸（FMN）；铁硫蛋白（FeS）；泛醌（辅酶Q）；细胞色素系统。

27、答：一型发酵：酵母菌在乙醇发酵中，将葡萄糖经EMP途径降解为两分子丙酮酸，丙酮酸脱羧生成乙醛，乙醛作为氢受体最后生成乙醇的过程。

其最终产物是乙醇。 二型发酵：当环境中存在亚硫酸氢钠时，它先与乙醛反应生成难溶的磺化羟基乙醛，迫使磷酸二羟丙酮代替乙醛作为受氢体，生成α—磷酸甘油，最后生成甘油的过程。其最终产物是甘油

三型发酵：在弱碱性条件下（PH7.6），乙醛因得不到足够的氢而积累，两个乙醛分子间会发生歧化反应，一分子乙醛被还原成乙醇，另一分子被氧化为乙酸，且需磷酸二羟丙酮担任氢受体，生成甘油的过程。 其最终产物是甘油、乙醇、乙酸

28、答：其依据是：

1） rRNA具有重要且恒定的生理功能；

2）在16SrRNA分子中，既含有高度保守的序列区域，又有中度保守和高度变化的序列区域 3）16SrRNA分子量大小适中，便于序列分析；

4）rRNA在细胞中含量大(约占细胞中RNA的90%)，也易于提取；

5）16SrRNA普遍存在于真核生物和原核生物中(真核生物中其同源分子是18SrRNA)。 因此它可以作为测量各类生物进化的工具。

29、答：不一定。 因为F- 菌株不含有F质粒（或致育因子），故F- 菌株没有性菌毛；而F+菌株是长有性菌毛，当F+ ×F-杂交时，其得到的接合子都是呈F+菌株，故都有性菌毛，但当Hfr × F-杂交时，F因子的先导区(leading region)结合着染色体DNA向受体细胞转移，F因子除先导区以外，其余绝大部分是处于转移染色体的末端，由于转移过程常被中断，因此F因子不易转入受体细胞中，故Hfr×F-杂交后的受体细胞(或接合子)大多数仍然是F-。即当F因子全部导入的接合子才有性菌毛产生。

30、答：1）水浸片或悬滴标本，在显微镜暗视野中观察； 2）用半固体穿刺接种培养观察；

3）可直接用鞭毛染色法染色后在显微镜下直接观察； 4）电子显微镜直接观察。

31、答：（1）灭菌：采用强烈的理化因素使任何物体内外部的一切微生物永远丧失繁殖能力的措施，称为灭菌，例如各种高温灭菌措施等。 （2）消毒：指采用较温和的理化因素，仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的病原菌，而对被消毒的物体基本无害的措施。

（3）防腐：利用某种理化因素完全抑制霉腐微生物的生长繁殖，从而达到防止食品等发生霉腐的措施。其主要措施有：①低温。利用4℃以下低温可以保藏食物、药品。②缺氧。采用在密闭的容器中加入除氧剂来有效地防止食品和粮食等的霉腐、变质，达到保鲜的目的。③干燥。采用晒干或红外线干燥等方法对粮食、食品等进行干燥保藏是最常见的防止霉腐的方法。④高渗。通过盐腌和糖渍等高渗措施来保存各种食物的防腐方法。⑤高酸度。用高酸度也可达到防腐的目的。⑥防腐剂。在有些食品、调味品、饮料或器材中，可以加入适量的防腐剂以达到防霉腐的目的。