01040甘草检验操作规程

编号： YP-TP-0-01040-01 制定人： 批准人： 题目： 共 4 页 甘草检验操作规程 制定日期： 审核人： 批准日期： 第 1 页 审核日期： 颁发部门：饮片质量管理部 生效日期： 分发部门：综合管理部、质量管理部、饮片质量管理部

目的：

建立甘草的检验操作规程。 范围：

适用于甘草的检验。 责任者：

饮片质量管理部对本规程的实施负责。 内容： 1 品名 甘草 2 编码 YL 01040

3 检验依据 《中华人民共和国药典》2010年版一部P80。 4 检验项目

4.1 性状 甘草 根呈圆柱形，长25～101cm，直径0.6～3.5cm。外皮松紧不一。表面红棕色或灰棕色，具显著的纵皱纹、沟纹、皮孔及稀疏的细根痕。质坚实，断面略显纤维性，黄白色，粉性，形成层环明显，射线放射状，有的有裂隙。根茎圆柱形，表面有芽痕，断面中部有髓。气微，味甜而特殊。

胀果甘草 根及根茎木质粗壮，有的分枝，外皮粗糙，多灰棕色或灰褐色。质坚硬，木质纤维多，粉性小。根茎不定芽多而粗大。

光果甘草 根及根茎质地坚实，有的分枝，外皮不粗糙，多灰棕色，皮孔细而不明显。

4.2 鉴别

4.2.1 仪器设备 显微镜、水浴锅、三用紫外仪、烘箱、电子天平、粉碎机、吹风机

编号： YP-TP-0-01040-01

题目： 共 4 页 甘草检验操作规程 第 2 页 4.2.2 玻璃仪器 量筒、漏斗、微量点样器、展开槽、容量瓶、喷瓶、硅胶G薄 层板、载玻片、盖玻片、回流冷凝管、蒸发皿、0.1%氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板、分液漏斗、移液管、胶头滴管

4.2.3 试剂与试液 乙醚、正丁醇、甲醇、甘草对照药材、甘草酸铵盐对照品、乙酸乙酯、甲酸、冰醋酸、硫酸、乙醇、水合氯醛溶液

4.2.4 操作方法

4.2.4.1 本品横切面：木栓层为数列棕色细胞。栓内层较窄。韧皮部射线宽广，多弯曲，常现裂隙；纤维多成束，非木化或微木化，周围薄壁细胞常含草酸钙方晶；筛管群常因压缩而变形。束内形成层明显。木质部射线宽3～5列细胞；导管较多，直径约至160μm；木纤维成束，周围薄壁细胞亦含草酸钙方晶。根中心无髓；根茎中心有髓。 粉末淡黄棕色。纤维成束，直径8～14μm，壁厚，微木化，周围薄壁细胞含草酸钙方晶，形成晶纤维。草酸钙方晶多见。具缘纹孔导管较大，稀有网状导管。木栓细胞红棕色，多角化，微木化。

4.2.4.2 取本品粉末1g，加乙醚40ml，加热回流1小时，滤过，药渣加甲醇30ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水40ml使溶解，用正丁醇提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，用水洗涤3次，蒸干，残渣加甲醇5ml使溶解，作为供试品溶液。另取甘草对照药材1g，同法制成对照药材溶液。再取甘草酸铵盐对照品，加甲醇制成每1ml含2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（SOP-QA-232-01）试验，吸取上述三种溶液各1～2μl，分别点于同一0.1%氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水（15：1：1：2）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，置紫外灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色荧光斑点；在与对照品色谱相应的位置上，显相同的橙黄色荧光斑点。

4.3 检查

编号： YP-TP-0-01040-01

题目： 共 4 页 甘草检验操作规程 第 3 页 4.3.1 水分 照“水分测定法”（SOP-QA-216-01）测定，不得过12.0%。 4.3.2 总灰分 取本品，照“灰分测定法”（SOP-QA-216-01）中总灰分测定法测定，不得过7.0%。

4.3.3 酸不溶性灰分 取本品，照“灰分测定法”（SOP-QA-216-01）中酸不溶性灰分测定法测定，不得过2.0%。

4.4.4 重金属及有害元素 照铅、镉、砷、汞、铜测定法(附录Ⅸ B原子吸收分光光度法或电感耦合等离子体质谱法)测定，铅不得过百万分之五；镉不得过千万分之三；砷不得过百万分之二；汞不得过千万分之二；铜不得过百万分之二十。

有机氯农药残留量 照农药残留量测定法(附录Ⅸ Q有机氯类农药残留量测定)测定，六六六(总BHC)不得过千万分之二；滴滴涕(总DDT)不得过千万分之二；五氯硝基苯(PCNB)不得过千万分之一。

4.4 含量测定

4.4.1 仪器设备 电子天平、高效液相色谱仪、超声仪、抽滤器 4.4.2 玻璃仪器 容量瓶，刻度吸管、胶头滴管、具塞锥形瓶、漏斗

4.4.3 试剂与试液 甘草苷对照品、甘草酸铵对照品、乙腈、乙醇、0.05%磷酸溶液、乙腈

4.4.4 操作方法

【含量测定】 照高效液相色谱法(附录Ⅵ D)测定。

色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A，以0.05%磷酸为流动相B，按下表进行梯度洗脱；柱温35℃；检测波长为237nm。理论板数按甘草苷峰计算应均不低于5000。

时间（分钟） 流动相A% 流动相B% 0～8 19 81

编号： YP-TP-0-01040-01

题目： 共 4 页 甘草检验操作规程 第 4 页 8～35 19—50 81—50 35～36 50—100 50—0 36～40 100—19 0—81

对照品溶液的制备 取甘草苷对照品、甘草酸铵对照品适量，精密称定，加70%乙醇制成每1ml含甘草苷20ug、甘草酸铵0.2mg的溶液，即得（甘草酸重量＝甘草酸铵重量/1.0207）。

供试品溶液的制备 取本品粉末（过三号筛）0.2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70%乙醇100ml，密塞，称定重量，超声处理（功率250W，频率40kHz）30分钟，取出，放冷，再称定重量，用70%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

本品按干燥品计算，含甘草苷（C21H22O9）不得少于0.50%；甘草酸(C42H62O16)以甘草酸铵计不得少于2.0％。