《基因工程》复习题（填空和选择）（15页）

A. SS→RF B. RF→RF C. RF→SS D. SS→SS

10.λ 噬菌体 DNA 和 M13 单链噬菌体 DNA 在成熟前的 DNA 复制类型为（ ）

A. 滚环复制模型 B.θ 复制模型 C. 前者为滚环复制模型，后者为 θ 复制模型 D.前者为 θ 复制模型，后者为滚环复制模型 12.以下对粘粒为载体的重组体的描述正确的是（ ）

A. 各重组体在平板上生长的速度不同，但是转化子中插入片段的扩增量是相同的 B. 各重组体在平板上生长的速度不同，转化子中插入片段的扩增量也是不同的

C. 各重组体在平板上生长的速度相同，而且转化子中插入片段的扩增量也是相同的 D.各重组体在平板上生长的速度不同，但是转化子中插入片段的扩增量是相同的 13.下列哪种克隆载体对外源 DNA 的装载量最大（ ）

A. 粘粒 B. 酵母人工染色体（YAC） C. 质粒 D.λ 噬菌体

14.同一种质粒 DNA ，以三种不同的形式存在，电泳时，它们的迁移速率是（ ）

A. L DNA>OC DNA>SC DNA B. SC DNA>L DNA>OCDNA C. SC DNA> OC DNA> L DNA D. OC DNA>SC DNA> L DNA 15.关于穿梭质粒载体，下面哪一种说法最正确（ ）

A. 在不同的宿主细胞中使用不同的复制起点 B. 在不同的宿主中具有不同的复制机制 C. 在不同的宿主细胞中使用不同的复制酶 D.在不同的宿主细胞中具有不同的复制速率 16.反向重复序列：（ ）

A. 参与转座子的转座 B.可以是某些蛋白的结合位点 C.可以回折形成发夹结构 D.以上说法都不对

17.λ 噬菌体线性 DNA 分子的两端各有一个（ ）个碱基组成的天然黏性末端

A. 10 B. 12 C. 14 D. 16

18.下列关于细菌人工染色体（BAC）的特点描述，除（ ）以外都是正确的

A. BAC 载体在细菌中以环状超螺旋状态存在，使分离操作比 YAC 容易 B. BAC 载体在大肠杆菌中为高拷贝

C.用电击法将大质粒转化大肠杆菌比酵母的转化率提高了 10～100 倍 D.克隆在载体上的外源片段可以直接进行末端测序

19.粘粒（cosmid）是一种人工建造的载体，下列对它的描述中哪一项是不正确的（ ）

A. 它具有 cos 位点，因而可以进行体外包装 B.它具有质粒 DNA 的复制特性

C. 进入受体细胞后，可引起裂解反应 D. 进入受体细胞后，可引起溶源化反应

20.松弛型质粒：（ ）

A. 在寄主细胞中拷贝数较多 B. 采用 θ 型复制方式 C.一定具有抗性标记 D. 以上均正确

21.关于质粒的不相容性，下列哪一种说法正确（ ）

A. 相同相容群的质粒能够共存于同一个细胞

B. 质粒可以分成若干个相容群，但不能分为若干个不相容群 C. 如果两个质粒不相容，说明它们的复制机制相同 属

D. 于同一个不相容群中的质粒，不仅复制机制相同，而且拷贝数和分子量也相同

22.一般情况下，质粒的存在情况以下描述正确的是（ ）

A. 独立存在 B. 整合在染色体上 C. 既可以整合在染色体上，也可以独立存在 D.不能独立存在

24.下列哪一项不是质粒载体必备的基本特征（ ）

A. 可以独立复制 B. 有选择标记 C. 有多克隆位点 D.含 lacZ 28.下面关于松弛型质粒的性质描述中，（ ）是不正确的

A. 通常带有抗性标记 B.可以使用氯霉素作用增加拷贝数 C.同严谨型质粒融合后，杂合质粒优先使用松弛型质粒的复制子

D.质粒的复制只受本身的遗传结构的控制，而不受染色体复制机制的制约，因而有较多的拷贝数

30.以下不是表达载体所必须的条件是（ ）

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A. 必须具备很强的启动子 B. 必须具备很强的终止子

C. 启动子不需要受控制 D. 所产生的 mRNA 必须具有翻译的起始信号

复习题4

二、填空题：将下列各题空缺部分的答案填在后面的方框内，两者用“；”隔开。

1.抽提含 pBR322 系列质粒的细菌前，需在培养基中加入一定浓度的氯霉素，此氯霉素的作用

是 。 2.在用SDS分离DNA时，要注意SDS的浓度，0.1%和1%SDS的效果是不同的，前者 ，

后者

3.在 Southern hybridization 中， DNA 经琼脂糖凝胶电泳后，通常须经 NaOH 处理，其原因

是 。

4.复性是指 ，杂交是指 。 5.DNA 或 RNA 在杂交前，需将其转移到膜上，常用的膜有 和 。 三、选择题：从备选答案中选出正确的结果，正确答案是唯一的。

1.用 SDS－酚抽提 DNA 时， SDS 浓度十分重要， 0.1% 和 1% 的 SDS 的作用分别为（ ）

A. 前者能将 DNA 和 RNA 一起分离出来；后者只能将 RNA 分离出来 B. 前者只能将 RNA 分离出来；后者能将 DNA 和 RNA 一起分离出来

C.二者均只能将 DNA 分离出来 D. 二者均能将 DNA 和 RNA 一起分离出来 2.从细胞或组织中分离 DNA 时常用蔗糖的作用（ ）

A. 抑制核酸酶的活性 B. 加速蛋白质的变性

C. 保护 DNA ，防止断裂 D. 有利于细胞破碎 3.以下保存 DNA 的温度中，哪一种是最好的（ ）

A. 室温 B. 4－5℃ C. －20℃ D. －70℃

4.在分离 DNA 过程造成 DNA 分子断裂的因素很多，下列说法中哪一项是不正确的（ ） A. 核酸酶的降解 B. 化学降解 C. 保存液中未加一滴氯仿 D. 物理剪切 5.关于 cDNA 的最正确的说法是（ ）

A. 以 mRNA 为模板合成的双链 DNA B. 同 mRNA 互补的单链 DNA C. 同 mRNA 互补的双链 DNA D. 以上都正确 6.一个典型的哺乳动物细胞中，大部分的 RNA 为（ ）

A. tRNA B. mRNA C. rRNA D. 核内小分子RNA 7.Agarose-EB 电泳法分离纯化 cccDNA 的原理是（ ）

A. EB 可以较多的插入到 cccDNA 中，因而迁移速度快 B. EB 不容易插入到 cccDNA 中，因而迁移速度快 C. EB 不容易插入到线性 DNA 中，因而迁移速度快 D. EB 不容易插入到线性 DNA 中，因而迁移速度慢 8.下列哪一项不是 Southern blotting 的步骤（ ）

A. 用限制酶消化 DNA B. DNA 与载体的连接

C. 凝胶电泳分离 DNA 片段 D. DNA 片段转移到硝酸纤维膜上 9.Southern blotting 的 DNA 探针（ ）杂交

A. 只与完全相同的片段 B. 可与用某些限制性内切酶切成的 DNA 片段 C. 可与任何含有相同序列的 DNA 片段 D. 可与任何含有互补序列的 DNA 片段 10.以下（ ）方法才能说明外源基因进行了表达

A. 原位菌落杂交 B. Southern blotting C. Northern blotting D. Western blotting 11.斑点杂交的缺点在于（ ）

A. 杂交速度较 Southern blotting 要快 B. 一次比 Southern blotting 可以分析多个样品 C.可分析混合的 DNA 样品中是否存在能与特定探针杂交的序列 D. 假阳性较高 12.菌落杂交筛选重组体时，（ ）

A. 需要外源基因的表达 B. 不需要外源基因的表达 C.不需要对菌体进行处理 D.以上说法都正确

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13.Southern blotting 与 Northern blotting 的区别在于（ ）

A. 印记的对象不同，前者是对 DNA ，后者是对 RNA B. 印记对象不同，前者是对 DNA ，后者是对蛋白质 C. 电泳条件不同，前者是变性条件，后者是非变性条件 D. 电泳条件相同，均为非变性条件 14.以下不属于核酸探针的是（ ）

A. RNA 探针 B. 基因组探针 C. cDNA 探针 D. 抗体

复习题5

二、填空题：将下列各题空缺部分的答案填在后面的方框内，两者用“；”隔开。

1.PCR 是 的简称。 PCR 反应体系的基本要素

有 ， ， ， 等。

2.PCR 反应过程分为三个步骤，即 ， 和 。

3.在 PCR 反应体系中， Taq polymerase 的合成速率取决于 ， ，dNTP 的

浓度， ， 等。

4.PCR 反应体系中往往要加入适量的矿物油，其作用是 。 5.PCR反应过程的最适温度仅与 有关，其定义是指 。 6.一般常规的 PCR 仅能扩增 kb 以下的 DNA 片段。 7.PCR 的标准缓冲液含 mmol/L KCl， mmol/L Tirs.HCl， mmol/L

MgCl2。

8.A/T cloning 是利用 。

9.随机引物（Random primer）是指 10.在简并引物的设计中，常常要用到 dI（次黄嘌呤），其原因是 。 三、选择题：从备选答案中选出正确的结果，正确答案是唯一的。 1.聚合酶链反应可表示为（ ）

A. PEC B. PER C. PDR D. PCR 2.催化聚合酶链反应的酶是（ ）

A. DNA 连接酶 B. 反转录酶 C. 末端转移酶 D. Taq DNA 聚合酶 3.以下各项中不是 PCR 反应所必须的是（ ）

A. 模板和引物 B. dNTP C. Taq 酶和 buffer D. 甘油 4.关于 PCR 技术的叙述，下列哪项是错误的？（ ）。

A. 以 DNA 复制为基础而建立起来的技术 B. 利用 PCR 技术可完全无误地扩增基因 C.反应体系需模板、一对引物、 4 种 dNTP 、耐热 DNA 聚合酶和缓冲溶液 D. 以变性-退火-延伸为一周期 5.有关 PCR 的描述下列哪项不正确：（ ）

A. 是一种酶促反应 B. 引物决定了扩增的特异性 C. 扩增的对象是氨基酸序列 D. 扩增的对象是 DNA 序列 6.以下关于简并引物的描述中，正确的是（ ）

A. 简并引物是根据已知 DNA 序列设计的引物群

B.简并引物是根据已知蛋白质的氨基酸序列设计的引物群 C.设计简并引物不需要考虑密码子的偏爱性 D.简并引物与普通的 PCR 引物是相同的

7.PCR 扩增有时会出现弥散的条带，以下原因阐述不正确的是（ ）

A. 退火温度过低 B. 退火温度过高 C. dNTP 浓度过高 D. 循环次数过多 9.设计聚合酶链反应的引物时，应考虑引物与模板的（ ）

A. 5' 端特定序列互补 B. 5' 端任意序列互补 C. 3' 端特定序列互补 D. 3' 端任意序列互补

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复习题6

二、填空题：将下列各题空缺部分的答案填在后面的方框内，两者用“；”隔开。

1. 年， 创立了测定 DNA 序列双脱氧终止法；同年， Maxam 和 Gilbert 发展了 。

3.在开始测序前，必须根据待测序列区的长度，所要求的测序精确度以及现有的设施来制定测序总策略。根据测序的目的，通常可将测序分为 和 。

4.常用的双脱氧终止法测定 DNA 序列，其长度一般不会超过 1Kb ，因此进行大分子 DNA 测序时，需 ，常用的方法有 、 和 。 三、选择题：从备选答案中选出正确的结果，正确答案是唯一的。

1.有两种确定核酸中核苷酸序列的方法：化学序列分析法（Maxam-Glbert）和酶学序列分析法（Sanger）。

酶学测序法的基本原理/优点是( )

A. 碱基与特殊燃料间不同的相互作用 B. 限制性位点与 DNA 末端标记的相关性

C.一个合成引物的延伸和 DNA 修复合成的可靠终止 D. 可同时对 DNA 双螺旋的两条链进行测序 2.有关 DNA 序列自动化测定的不正确叙述是( )

A. 用荧光代替了同位素标记 B. 激光扫描分析代替人工读序 C. 基本原理与手工测序相同 D. 不再需要引物

复习题 7

二、填空题：将下列各题空缺部分的答案填在后面的方框内，两者用“；”隔开。

1.基因突变（Gene mutation）的类型有 ， ， 等。 3.利用 PCR 技术介导的定点诱变（Site-directed mutagenesis）。较常用的方法一般有三种

即 ， 和 。

复习题 8

二、填空题：将下列各题空缺部分的答案填在后面的方框内，两者用“；”隔开。 1.构建 Gene library 时，应根据所要分离的外源基因的大小选择合适的载体，这些载体通常包含有 λ 噬

菌体、YAC 以及 、 和 等。

2.构建 cDNA library 时， cDNA 的第二链合成的方法主要有 、

和 。

3.构建低丰度 mRNA 的 cDNA library ，需进行富集处理，常用的富集方法有 、

和 。

4.常规用于构建 cDNA library 的两种 λ 噬菌体载体是 λgt10 和 ， λgt10 用于构建只

用核酸探针筛选的文库，而后者用于

6.Gene cloning 的目的是 ，常用的方法有 、 和 等。 7.噬菌斑形成选择法有两种判断标准，一是 ，二是 。 8.基因克隆的本质是 ，重点是 。 三、选择题：从备选答案中选出正确的结果，正确答案是唯一的。 1.构建基因组 DNA 文库时，首先要分离细胞的（ ）

A. 染色体 DNA B. 线粒体 DNA C. 总 mRNA D. tRNA 2.基因组代表一个细胞或生物体的（ ）

A. 部分遗传信息 B. 整套遗传信息 C. 可转录基因 D. 非转录基因 4.关于 DNA 接头在基因工程中的作用，下列说法中哪一项不正确（ ） A. 给外源 DNA 添加适当的切点 B. 人工构建载体 C. 调整外源基因的可读框 D. 增加调控元件

5.根据构建方法的不同，基因文库分为基因组文库、 cDNA 文库等。在下列文库中，（ ）属于 cDNA

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