《基因工程》复习题（填空和选择）（15页）

基因工程复习题（填空和选择）

复习题1

二、填空题：将下列各题空缺部分的答案填在后面的方框内，两者用“；”隔开。 1.基因操作（Gene manipulation）的核心部分是基因克隆（gene cloning）， gene cloning 的基本要点

有 ， 和 。

2. 是遗传物质的基本单位,也是作为遗传物质的核酸分子上的一段片段。它可以是连续的，也可以是 ；可以是 ，也可以是RNA；可以存在于染色体上，也可以

3.基因操作并不是一个法律概念，除了包括基因克隆外，还包括基因的 、 、 和 等与基因研究相关的内容。

4.启动子（Promotor）是指 。通常一个 Gene 是否表达， 是关键的一步，是起决定作用的。在转录过程中，Promoter还是 的结合位点。

5.原核生物的 RNA polymerase 主要由两部分组成： 和 ，其中σ-因子并不参与 RNA 的合成，它的作用主要是 。

6.从 到 的这一段距离称为一个转录单位，或者一个转录产物，其中可包括一个或者多个 Gene 。

7.转录终止子主要有两种，一种是 ，另一种是 。

8.重叠基因（Overlapping gene）是指 ，间隔基因（Interrupted gene）是指

复习题2

二、填空题：

1.Ecok 的一般分子组成为 R2M2S ，在这些亚基中， R 亚基具有 的作用， M 亚基具有 的作用， S 亚基具有 的作用。

2.限制性内切核酸酶（Restriction endonuclease）的命名是按属名和种名相结合的原则的，通常第一个大

写字母取自 ，第二、三个字母取自 ，第四个字母 则用 表示。 3.Ⅱ型限制酶识别回文对称序列，在回文序列 或 切割 DNA ，产生带 （3'

－OH）和 （5'－P 基团）的 DNA 的产物，需（Mg2+）的存在才能发挥活性，相应的修饰酶只需 SAM 。 4.识别相同序列的限制酶称

5.有些限制酶只切割双链 DNA 中的一条链，产生单链缺口，即 6.个体间 DNA 限制性片段长度的差异叫 7.DNA 载体经 HindⅢ 切割后产生粘性末端，能发生载体自连，影响载体与外源 DNA 的连接效率，

常用的防止载体自连的方法有 、 。 8.完全的回文序列应具备两个特点即 和 。

9.Dcm Methylase（Dcm 甲基化酶）的识别序列为 和 ，该酶的作用位点为 。

10.大肠杆菌中至少有三种依赖于甲基化的限制系统 、 、 。

它们识别的序列各不相同，但只识别经过甲基化的序列，都限制 CpG 甲基化酶作用的 DNA 。 11.分别写出以下限制性内切核酸酶（Restriction endonuclease）的识别序列 EcoRⅠ 、Sau3A

Ⅰ 、HindⅢ 。

12.限制性内切核酸酶（Restriction endonuclease）通常保存在（50%）浓度的甘油溶液中。 13.载体和外源 DNA 经酶切，在进行下一步操作前，需消除限制性内切核酸酶（Restriction endonuclease）

的影响。常用的方法有 、 、 、 。 参考答案： EDTA 法；加热法；苯酚抽提法；试剂盒除酶法

14.反转录酶来自 AMV 或 Mo－MLV ，即依赖于 RNA 的 DNA 聚合酶，它有 活性，但

无 活性。

1

15.末端转移酶来源于 ，是存在于前淋巴细胞及分化早期的类淋巴样细胞内的一种不寻常的

DNA 聚合酶，在 存在下，末端转移酶催化 dNTP 加于 DNA 分子的 3' 羟基端。 参考答案： 小牛胸腺；Mg2＋

16.T4 DNA 连接酶的分子量为 68kDa ，它可以催化 DNA 5' 磷酸基与 3' 羟基之间形成磷酸二酯键。

反应底物为粘端、切口、平端的 RNA 或 DNA 。低浓度 和 可以提高平端连接效率。 参考答案： 聚乙二醇 PEG；单价阳离子 三、选择题：从备选答案中选出正确的结果，正确答案是唯一的。 1.限制性内切酶一般保存在（ ）浓度的甘油溶液中。

A.10% B.20% C.50% D.60%

2.限制性图谱与限制性片段长度多态性（RFLP）图谱的最显著区别在于（ ） A. 前者是物理图谱后者是连锁图 B. 前者是连锁图后者是物理图谱

C. 前者是遗传图谱后者是物理图谱 D.前者是物理图谱后者是遗传图谱 3.迄今为止所发现的限制性内切核酸酶可以作用于（ ） A. 既可以作用于双链 DNA ，又可以作用于单链 DNA

B.只能作用于单链 DNA C. 只能作用于双链 DNA D.只能作用于 RNA

4.已知某一内切酶在一个环状 DNA 上有 4 个切点，当用此酶切割该环状 DNA ，可以得到（ ）个

片段

A. 3 B. 4 C. 5 D. 6

5.甘油会使许多限制性内切核酸酶的特异性发生改变，是导致一些酶星星活性的主要原因之一，防止的

办法是在酶切反应体系中，将甘油的浓度控制在（ ）以下 A.5% B. 10% C. 20% D.30%

6.在下列进行 DNA 部分酶切的条件中，控制哪一项最好（ ） A..反应体积 B.酶反应温度 C. 反应时间 D.酶量

7.DNA 被某种酶切割后，电泳得到的电泳带有些扩散，下列原因中，哪一项不太可能（ ）

A. 蛋白质（如 BSA）同 DNA 结合 B.有外切核酸酶污染 C.酶失活 D.酶切条件不适合 8.nick 与 gap 的区别在于（ ）

A.前者是断开了一个磷酸二酯键，后者是指 DNA 的单链中有较小的缺失

B.前者是是指 DNA 的单链中有较小的缺失，后者是指断开了一个磷酸二酯键 C.二者无本质区别 D.前者无法回复，后者可以回复 9.限制酶的命名遵循一定的原则，涉及来源（宿主），菌株或生物型。命名时（ ）

A.属名第一字母，种名头两个字母，菌株号，然后再加上序号（罗马字） B.种名第一字母，属名头两个字母，菌株号，然后再加上序号（罗马字） C.属名第一字母，亚种名头两个字母，菌株号，然后再加上序号（罗马字） D.种名第一字母，亚种名头两个字母，菌株号，然后再加上序号（罗马字） 10.以下对同裂酶的描述中，哪一项是正确的（ ）

A.识别相同序列的限制酶称同裂酶 B.可以产生相同的粘性突出末端的限制酶称同裂酶 C.同裂酶的切割位点一定相同 D.同裂酶的切割位点不相同 11.下列哪一种酶作用时需要引物（ ）

A. 末端转移酶 B.反转录酶 C.DNA 连接酶 D.限制酶

12.关于宿主控制的限制修饰现象的本质，下述描述中只有（ ）不恰当

A.由作用于同一 DNA 序列的两种酶构成

B.这一系统中的修饰酶主要是通过甲基化作用对 DNA 进行修饰 C.不同的宿主系统具有不同的限制-修饰系统

D.这一系统的核酸酶都是Ⅱ类限制性内切核酸酶 13.限制性内切核酸酶可以特异性地识别（ ）

A. 特定的三联密码 B.双链 DNA 的特定碱基对 C.双链 DNA 的特定碱基序列 D.单链 DNA 的特定碱基序列 14.在大肠杆菌中，大多数都有三个位点特异性的 DNA 甲基化酶，以下选项中哪一种酶不包括在内（ ） A. dam B. dcm C. EcoKⅠ D. SssⅠ

2

15.在大肠杆菌中，至少有 3 种依赖于甲基化的限制系统，以下选项中不属于这 3 种的为（ ）

A. mcrA B. mcrBC C. mcrD D. mrr 16.下面有关限制酶的叙述哪个是错误的（ ）

A.. 限制酶是外切酶而不是内切酶

B. 同一种限制酶切割 DNA 时留下的末端序列总是相同的

C. 一些限制酶在识别位点内稍有不同的点切割双链 DNA ，产生粘末端 D.一些限制酶在识别位点内相同的位置切割双链 DNA ，产生平末端

17.DNA 连接酶在体内的主要作用是在 DNA 复制、修复中封闭缺口，下列对 DNA 连接酶的描述中，

哪项是正确的（ ）

A. 将双链 DNA 分子中的 5' 磷酸基团同 3'－OH 末端重新形成磷酸二酯键

B.作用时不消耗能量 C. 需要 Mn2+ 等二价辅助离子 D.也可以连接 RNA 分子

复习题3

二、填空题：将下列各题空缺部分的答案填在后面的方框内，两者用“；”隔开。

1.载体（Vehicle）的类型有 ， ， ， 等。 2.Gene cloning 是指 ，

基因文库（Gene library）是指 。

3.Plasmid 的定义是 ， Plasmid 能进行自我复制，大多数为 链

状 DNA 分子，大小一般为 kb。

4. 即为质粒的拷贝数，按照质粒拷贝数的多少，质粒可以分为

和 ， 质粒多数是一些具有转移能力的大质粒； 质粒多数是一些不具有转移能力的小质粒。

5.松弛型质粒和严谨型质粒融合以后，杂合质粒一般优先使用 的复制子。

6. 称之为质粒的不相容性。如果两个质粒不能稳定地共存于同一个寄主细胞中，则它们属于 （填相同或不同）的不相容群。

7.质粒具有转移性，它是指 ，它需要（移动基因 mob），（转移基因 tra）和（转移起

始位点）

8.根据质粒的转移性可以将质粒分为 和 ，一般大质粒都是 ，

一般都是小质粒，其上没有

9.按其用途可将标记基因分为选择标记和筛选标记，选择标记一般用于 ，筛选标记一般用

于

11.pBR322质粒是基因工程最重要的人工质粒之一，它的大小约为 kb，用于其组建的三个亲

本质粒是 , ,和 。此质粒具有一个colE1松弛型质粒复制子，两个筛选标记氨苄青霉素抗性基因和四环素抗性基因，其中colE1松弛型质粒复制子来源于 ，氨苄青霉素抗性基因来源于 ，四环素抗性基因来源于 12.pUC 系列的质粒载体是由 和 两种质粒构建而来的，其中氨苄青霉素抗性

基因来自于 ，多克隆位点 MCS 来自于 。 pUC 系列的质粒载体一般是成对存在的如 pUC18 和 pUC19 ，其主要区别是 。

14.λ 噬菌体 Genome 的长度约为 kb，其 DNA 分子为 （填单或双）链。它的 DNA 分子既可以以 状存在也可以以环状存在，而且可以自然成环，其原因是在 λ 噬菌体的线性分子的两端各有一个长度为 个碱基的天然粘性末端，这种粘性末端可以自然成环，成环后的粘性末端就叫做 。

15.λ 噬菌体在感染大肠杆菌以后，可以进入 Lytic growth 也可以进入 Lysogenic state 。如果其基因组

DNA 通过专一性重组整合到宿主染色体中，则其进入 ；它也可以选择进入 ，大量复制并组装子代噬菌体颗粒。

16.在 λ 噬菌体载体中，常用的选择标记有 ，cⅠ基因失活，和 等。 17.改造后的 λ 噬菌体才可用作载体，按照改造方式的不同可将其分为两种类型，即插入型载体（insertion vectors）和替代型载体（replacement vectors）。其中 Insertion vectors 是指 ； Replacement vectors 是指

3

18.λgt10 是一个由 λ 噬菌体衍生而来的 insertion vectors ，主要用于 。它缺失了含有溶

源整合的 ； λgt11 载体也是一种 insertion vectors ，该载体的最大特点是在最左侧可替

代区置换了一段 基因，可编码 β-半乳糖苷酶，在 IPTG/X-gal 平板上可形成 色噬菌斑。 参考答案： 克隆小的 cDNA；b257；lacZ；蓝

19.λ 噬菌体由于受到包装的限制，插入外源 DNA 片段后，其总的 DNA 长度应该在噬菌体 genome

的 范围内。

20.Cosmid 实际上是由 和 构成的杂合载体，也可以说是带有 序

列的质粒。

22.Cosmid 的组成包括三个部分： ， 和 ，其中复制子来源

于 ，cos 序列来源于 。

23.λ 噬菌体的最大克隆片段是 kb， Cosmid 的最大克隆片段可达到 kb。 24.利用 λ 噬菌体载体构建的 gene library 中，文库是以 的形式存在的；用质粒载体构建的 gene library 是以 的形式存在的；粘粒载体构建的 gene library 是以 的形式存在的。

25.M13 噬菌体颗粒是 状的，其基因组为 （填单或双）链 DNA 。它只感染

性大肠杆菌，感染宿主以后，其噬菌体颗粒的释放不像 λ 噬菌体那样要裂解宿主菌，而是 。

28.M13K07 辅助噬菌体是 的衍生株，它带有一个来自 的复制起点，还带有一

个来自 的卡那霉素抗性基因，用作选择标记；基因 Ⅱ 带有一个 的突变，导致基因蛋白质第 40 位氨基酸由甲硫氨酸变为异亮氨酸。

29.YAC 载体基本组成元件有 ， ， ，

和 。

30.表达载体（Express vector）是在常规载体的基础上衍生而来的，其构建的原理主要是增加一

个 ，以及有利于表达产物的分泌、分离或纯化的元件；穿梭载体（Shuttle vector） 是指

三、选择题：从备选答案中选出正确的结果，正确答案是唯一的。 1.氨苄青霉素的工作原理为（ ）

A. 可以抑制细胞壁肽聚糖的合成 B. 可以抑制核糖体的转位 C. 可以与核糖体 50S 亚基结合并抑制蛋白质合成 D.可以与核糖体 30S 亚基结合并抑制蛋白质合成

3.载体所具备的特点中，以下描述不恰当的是（ ）

A. 必须具备复制起点，能够自主复制

B.必须具备合适的酶切位点，供外源 DNA 片段插入 C.有一定的筛选标记，用于筛选

D. 必须具有较高的拷贝数，便于制备

4.复制子由三部分组成，以下不属于的为（ ） A. 复制起点 B. 复制区 C. 复制终点 D.启动子

5.pBluescript M13 载体在多克隆位点的两侧引入了 T7 和 T3 两个噬菌体的启动子，这样增加了该载

体的功能，以下 4 种功能哪一种是不正确的（ ） A. 可以对插入到多克隆位点的外源片段进行转录分析 B. 利用这两个启动子的通用引物进行 PCR 扩增 C. 利用通用引物进行序列分析

D.利用这两个启动子进行定点突变 6.以粘粒为载体转染受体菌后，平板上生长的菌落会出现大小不一、生长速度不一的现象，其原因是（ ）

A. 营养成分不足 B.重组后的质粒复制不稳定

C. 重组后的粘粒整合到宿主染色体上 D. 重组体中插入片段的大小不同 7.噬菌粒是由质粒和噬菌体 DNA 共同构成的，其中来自质粒的主要结构是（），而来自噬菌体的主要

结构是（ ）

A.复制区； B. IG 区 IG 区；C. 复制区 多克隆位点； D. IG 区 IG 区；多克隆位点 9.M13 单链噬菌体的复制分为三个阶段，以下哪一项不属于此（ ）

4