金银花干叶中黄酮类物质提取工艺研究

黄酮含量 （mg/g） 40 35 30 25 20 15 10 5 0 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 温度（℃）

图-5温度对提取效果的影响

4.3 正交试验结果

由单因素考察实验结果，可得正交试验因素水平表如表-3所示，根据正交因素水平表进行正交试验，其结果如表-4所示。

表-2正交试验因素水平表

因素水平 A B C D

乙醇浓度(%) 超声波时间(min) 料液比(g/ml) 提取温度(℃)

1 50 10 1∶10 40 2 60 20 1∶15 50 3 70 30 1∶25 60

表-3正交试验结果

处理号 A B C D Abs

乙醇浓度 超声波时间 料液比 提取温度 吸光度 总黄酮含量

（%） （min） （g/ml） （℃） （mg/g）

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1 50 10 1∶10 40 0.208 29.8 2 50 20 1∶15 50 0.211 30.2 3 50 30 1∶25 60 0.265 37.6 4 60 10 1∶15 60 0.220 31.3 5 60 20 1∶25 40 0.204 29.3 6 60 30 1∶10 50 0.227 32.4 7 70 10 1∶25 50 0.239 34.0 8 70 20 1∶10 60 0.275 38.9 9 70 30 1∶15 40 0.243 34.6 T1 97.6 95.1 101.1 93.7 T2 93.0 98.4 96.1 96.6 T3 107.5 104.6 100.9 107.8 K1 32.5 31.7 33.7 31.2 K2 31.0 32.8 32.0 32.2 K3 35.8 34.9 33.6 35.9 R 3.3 3.2 1.7 4.7

由于实验存在各方面的误差，实验所得数据的误差要控制在一个合理的范围内，将误差较大的数据剔除，因此运用Q检验对实验数据可疑性检验，检验结果如表-4所示。表-4显示，Qn均小于0.333，所以本次实验所得的数据处于合理的误差范围内，无须剔除。

表-4数据可疑性检验结果

X1 X2 X3 X4 X5 X6 X7 X8 X9

29.3 29.8 30.2 31.3 32.4 34.0 34.6 37.6 38.9 |Xn?Xnext| 0.5 0.4 1.1 1.1 1.6 0.6 3 1.3 1.3

X9?X1 9.6

Qn 0.052 0.042 0.115 0.115 0.167 0.0625 0.313 0.135 0.135 注：Qn=

|Xn?Xnext|

X9?X18

表-5方差分析表

误差来源 偏差平方和（s） 自由度（f） 均方（s/f） F 临界值（P） A 12.06 2 6.03 5.18 F0.05（2,2）= 19 B 5.29 2 2.65 8.48 F0.01（2,2）= 99 C 1.82 2 0.910

D 12.26 2 6.13 45.3 F0.1（2,2）= 9 T 31.43 8 F0.2（2,2）= 4 由正交试验结果和方差分析可知：R(D) ＞R（A）＞R（B）＞R(C)，影响因素的主次顺序为D > A > B > C ，提取温度对金银花干叶中黄酮提取的影响最显著，乙醇浓度和提取时间次之，乙醇浓度的影响比提取时间略为明显，影响最小的因素的是料液比。金银花干叶超声波提取黄酮的最佳工艺条件为：A3B2C1D3。 4.4 金银花各部分的黄酮提取与含量测定 4.4.1 实验方法

称取3g经过预处理的金银花干枝、干叶、鲜枝、鲜叶和干花各一份，按1:10加入体积分数为70%的乙醇，于60℃下超声波仪超声提取20min。真空抽滤，并用70%乙醇溶液反复冲洗提取容器和抽滤瓶将冲洗液并入滤液中，用相应浓度的乙醇定容至100ml，取样测定吸光度。 4.4.2 结果与分析

表-4金银花各部分的黄酮含量测定结果

项目 干叶 干枝 鲜叶 鲜枝 干花 样品质量（g） 3 3 3 3 3 取样量（ml） 2 2 2 2 0.2 定容体积（ml） 25 25 25 25 25 吸光度/Abs 0.273 0.326 0.247 0.234 0.128 总黄酮含量（mg/g） 38.7 45.9 35.1 33.3 188.9

由表-8可知，金银花植物各部分的黄酮含量依次为：干花 ＞干枝＞干叶＞鲜叶＞鲜枝。结果表明金银花干花的黄酮含量最高，黄酮含量比干枝、干叶和鲜枝、鲜叶高约4-6倍。

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5 结论与展望

本次实验所得的最佳提取工艺为70%乙醇为溶剂、物料比1:10，超声波温度60℃提取20min（最佳组合为A3B2C1D3），各影响因素之间确实存在交叉影响的现象，最佳提取工艺条件不是各因素最佳水平的简单组合（A2B3C2D1）。对超声波提取金银花干叶中黄酮类物质影响最明显的因素是超声波温度，乙醇浓度的影响比提取时间略为明显，影响最小的因素是料液比。

金银花干花的黄酮含量最高，比干枝、干叶和鲜枝、鲜叶高约4-6倍。金银花干花的药用价值比其他部分高，但是干花的价格比其他四种资源高并且来源少，仅适用于需要高纯度黄酮类物质的医药生产；干叶、干枝的来源广泛、价格便宜，采集容易，但干制需要耗费时间和成本，仅适用于周期产量小的药药品、保健食品生产；鲜枝、鲜叶的黄酮含量与其干制品接近并且鲜枝、鲜叶来源广泛，采集容易，现摘现用不需干制，但鲜枝、鲜叶中含色素较多，纯化难度大，仅适用于需要大规模生产的食品和食品添加剂等行业。在实际生产使用中，为了追求经济效益，应该综合各方面影响因素进行选材。

从植物中提取黄酮的方法众多，除了传统的提取方法（有机溶剂提取、热水提取、碱性水或碱性稀醇提取、系统溶剂提取等），近年也开发出不少的新型方法，如：微波提取法、酶解法、超临界流体萃取法、半仿生提取法等。[13]但这些新型的提取方法应用于金银花黄酮提取的研究成果尚未见有相关文献报道，相信随着提取方法和提取设备的深入研究，更多新型的提取方法被应用于金银花黄酮类物质的提取，为金银花植物的医药应用开辟更广阔的天地。

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指导老师： 盖章：

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