基因工程原理教学大纲

三、PCR的类型及应用（B） 第五节 DNA序列分析(2) 一、双脱氧链终止法（A）

二、Maxam-Gilbert化学修饰法（B） 三、DNA杂交测序（C） 四、DNA自动化测序（C） 第六节 酵母双杂交系统(2) 一、酵母双杂交系统的作用（B） 二、酵母双杂交系统的原理（B） 三、构建双杂交体系的宿主菌（B） 四、构建报告基因（B）

五、构建双杂交体系的穿梭质粒（B） 六、酵母双杂交的实验过程（B） 第七节 RNA干扰（RNAi）

第七章 克隆基因的表达（８） （1）教学目的：

真核和原核细胞中表达外源基因的特点。在原核生物中基因表达的调控序列有 哪些。原核生物中的表达载体的种类及其代表性表达载体的组成及特点。酵母中表达载体的类型及其代表性表达载体的组成及特点。植物基因克隆的载体，了解Ｔi质粒的种类特性Ｔi质粒的改造，植物基因工程载体pGV3850的组成及特点。动物表达载体所应具备的条件，ＳＶ４０病毒的的组成及特点，受纳细胞、非受纳细胞的定义。ＳＶ病毒改造成载体的原则。晚期区与早期区表达外源基因的过程。PSV 2载体的组成及特点。哺乳动物基因转移的遗传选择标记。外源基因导入真核细胞的方法。 （2）难点和重点

在原核生物中基因表达的调控序列有哪些。原核生物中的表达载体的种类及其代表性表达载体的组成及特点。酵母中表达载体的类型及其代表性表达载体的组成及特点。植物基因克隆的载体，Ｔi质粒的种类特性Ｔi质粒的改造，植物基因工程载体pGV3850的组成及特点。ＳＶ４０病毒的的组成及特点，受纳细胞、非受纳细胞的定义。ＳＶ病毒改造成载体的原则。晚期区与早期区表达外源基因的过程。PSV 2载体的组成及特点。哺乳动物基因转移的遗传选择标记。外源基因导入真核细胞的方法。

第一节 原核基因在原核细胞中的表达（4） 一、原核生物基因表达的特点（B） 二、原核表达系统的注意事项（A） 三、原核生物基因表达的调控（B）

四、外源蛋白在大肠杆菌中的表达部位（B） 五、几种类型的原核表达载体（A） 六、影响外源基因表达效率的因素（A） 七、细菌表达载体举例（A） 八、原核细胞表达的缺陷（B）

第二节 外源基因在真核细胞中的表达(3) 一、在酵母细胞中常用的载体（A） 二、在植物中表达载体（A）

三、动物细胞基因克隆的载体（A）

第三节 几种常用的真核生物重组基因选择方法(1) 一、哺乳动物基因转移的选择标记（A）

二、植物转化体报道基因筛选法（A） 第四节 外源基因导入真核细胞 一、导入酵母细胞（A） 二、导入植物细胞（A） 三、导入哺乳动物细胞（A）

第八章 植物的基因工程（4） （1）教学目的：

了解植物在基因工程方面的优缺点，用叶盘法再生植株的方法。植物基因转移的途径有哪些，植物冠瘿瘤产生的原因参与Ｔ－ＤＮＡ转移的成分，Ｔ－ＤＮＡ整合进植物染色体的机制。共整合载体克隆外源基因的方法。电击法和基因枪法转移基因至植物中的原理。在植物中表达外源基因有哪些方面的应用。

（2）难点和重点

植物基因转移的途径有哪些，植物冠瘿瘤产生的原因参与Ｔ－ＤＮＡ转移的成分，Ｔ－ＤＮＡ整合进植物染色体的机制。共整合载体克隆外源基因的方法。电击法和基因枪法转移基因至植物中的原理。在植物中表达外源基因有哪些方面的应用。

第一节 再生植株（１）

一、植物在遗传工程方面的优缺点（B） 二、单个细胞可生长成完整植株（B） 三、用叶盘法再生植株（A）

第二节 植物基因转移的途径（2） 一、土壤农杆菌法（A） 二、电击法（A） 三、基因枪法（A）

第三节 植物外源基因的表达（１）

一、表达病毒外壳蛋白、核酶和反义ＲＮＡ（B） 二、表达微生物毒素蛋白（B） 三、表达抗除草剂基因（B）

四、表达影响花颜色、形态和生长特性的基因（B）

第九章 转基因动物（４） （1）教学目的：

了解转基因动物的定义，转基因小鼠的发展过程，转基因小鼠建立的方法有哪些，它们的原理是什么。转基因家畜的应用。 （2）难点和重点

转基因小鼠建立的方法有哪些，它们的原理是什么。转基因家畜的应用。 第一节 转基因小鼠（３）

一、显微注射法制备转基因小鼠（B） 二、病毒转染法制备转基因小鼠（B）

三、以生殖细胞为载体制备转基因小鼠（B） 四、胚胎干细胞法制备转基因小鼠（B） 第二节 转基因家畜（１）

一、重组生长激素促进动物泌乳和改善饲料利用率（B）

二、转基因家畜（B）

三、用转基因动物生产药物蛋白（B） 四、表达病毒外壳蛋白提高抗病性（B）

考核方式：平时成绩（20%），期末考试（80%，闭卷）

作业：1、基因工程药物的发展状况。

2、转基因植物的发展状况

六、 实验内容与要求 序号 1 2 3 4 5 实验内容 学时 七、 教材与参考书

本课程选用教材：

基因工程学原理 马建岗主编，西安交通大学出版社 2003

本课程推荐参考书： 参考书

基因工程 杨汝德主编,华南理工大学出版社 2003 基因工程原理 吴乃虎编著 科学出版社 2002

基因工程 楼士林 杨盛昌 龙敏南等编 科学出版社 2002 植物基因及分子操作 顾红雅，瞿礼嘉等编 北京大学出版社 1997

执笔：胡汉桥 审核： 批准人： 时间：