微生物制药实验大纲

西南大学

《微生物制药实验》本科课程教学大纲

药学院 2014年编制

一、课程基本信息

课程名称：（中文）： 微生物制药学实验

（英文）： Microbial Pharmaceutics

课程编号：29322000

课程性质：专业发展课程/必修课 适用专业：制药工程专业 开课学期：第5学期 课程学时：36学时 课程学分：2.0

先修课程：生物化学、微生物学 并修课程：发酵工程 课程简介：

《微生物制药实验》是制药工程专业教学过程中重要的教学实践环节，它是在学习了有关基础课和专业基础课（如生物化学、微生物学、药理学等）的基础上开设的，主要涉及到到微生物菌种的来源、分离和保藏，微生物代谢产物的初筛和复筛，微生物高产菌株的诱变育种，微生物培养过程的优化等方面的内容。通过本课程的学习，使学生比较全面地掌握微生物制药工艺中与微生物相关的上游技术，并培养学生灵活适用所学理论知识分析、解决生产实际问题的能力，努力做到理论联系实际。 选用教材：

《微生物制药实验》自编。 参考书目：

[1] 扬文博，微生物学实验.北京:化学工业出版社，2004。

[2]黄秀梨、辛明秀主编，微生物学实验指导，高等教育出版社，2008年。 [3]周德庆 微生物学实验教程 （第3版）高等教育出版社,2013年。 二、课程教育目标（说明通过本课程学习，学生知识、能力、思想情感及素质等方面发展所要达到的预期结果）

通过本课程教学使学生获得微生物制药学的基本理论，各种微生物生产的药物类型、特点、质量要求、工艺路线、提取方法和质量评价等方面的专业知识。学生具有微生物制药生产的理论、技术和质量控制等的基本理论知识和实践技能

，微生物制药工艺的优化与设计能力，学会研究和设计如何将微生物制备成能治病的药物，并能批量生产出质量优良的药物来满足医疗与预防的需要，培养学生的学习能力、科学分析综合能力及科学思维方法，为从事微生物制药的生产、研究、开发新的药物等工作奠定基础。

三、课程学时分配 实验课题

1.产淀粉酶高产菌株的分离、筛选、诱变育种及培养基优化。 2.产蛋白酶高产菌株的分离、筛选、诱变育种及培养基优化。 3.产β-内酰胺酶高产菌株的分离、筛选、诱变育种及培养基优化。 4.产柠檬酸高产菌株的分离、筛选、诱变育种及培养基优化。

内 容 学 时 实验一 实验方案拟定 2 实验二 培养基制备 3 实验三 生产菌种的分离培养与保藏 4 实验四 初筛与复筛 10 实验五 微生物诱变与育种

10

实验六 微生物生长曲线测定 10 实验七 微生物培养基优化

10

实验八 实验交流 4 实验1-4为必选实验，实验5-7任选2个

以下以蛋白酶产生菌为例介绍实验

许多细菌和霉菌产生蛋白酶，细菌中的芽孢杆菌是常见的蛋白酶产生菌。本实验将土壤样品悬液加热处理，杀死非芽孢细菌及其它微生物后进行划线分离得到芽孢杆菌，将其接种到酪蛋白平板进行培养，根据酪蛋白平板的水解圈做初筛。也可直接将细菌或霉菌接种到酪蛋白平板进行培养，分离筛选其它蛋白酶产生菌。本实验主要包括：蛋白酶产生菌的分离纯化、产酶微生物菌种的选育、产酶微生物的发酵与酶活力的测定、蛋白酶产生菌的生长及生长曲线、培养基优化。 通过本实验项目，使学生学会从自然界中分离蛋白酶产生菌的方法，菌种的纯

化技术、高产菌的选育技术；了解蛋白酶产生菌的生长情况，学会绘制其生长曲线；学会培养基优化的方法；了解蛋白酶的性质及蛋白酶的测定原理；掌握蛋白酶的发酵及酶活力测定方法。 1 实验材料 1.1 实验样品 校园内土壤样品 1.2实验仪器与材料

牛肉膏蛋白胨培养基平板、酪蛋白平板、无菌水（带玻璃珠）、芽孢染色液番红；显微镜、恒温水浴锅、酒精灯、接种针、游标卡尺、无菌移液管、无菌试管、血球计数板、试管、三角烧瓶、烧杯、量筒、，玻棒、电子天平、牛角匙、高压蒸汽灭菌锅、pH试纸（ pH 5．5—9．0）、棉花、牛皮纸、记号笔、麻绳、纱布、培养皿、胶头滴管、分光光度计（应符合GB9721的规定）等。 2实验方法与步骤 2.1 培养基的配制方法 1.称量

按培养基配方比例依次准确地称药品放入烧杯中。 2.溶化

在上述烧杯中可先加入少于所需要的水量，用玻棒搅匀，然后，在石棉网上加热使其溶解。待药品完全溶解后，补充水分到所需的总体积。 3.调pH 4.分装

按实验要求，可将配制的培养基分装入试管内或三角烧瓶内。 5．包扎

塞好棉花的试管和锥形瓶应盖上厚纸用绳捆扎，用记号笔注明培养基名称、组别、日期。 6．灭菌

将上述培养基以1.02kg/cm2（15磅/英寸2），121．3℃， 15-20min高压蒸汽灭菌。如因特殊情况不能及时灭菌，则应放入冰箱内暂存。 7．制作平板

将灭菌后的培养基冷凝至55~60℃,放在超净台上，点燃酒精灯，右手托起