2021版高考生物（人教版）一轮复习高效作业知能提升：第十一单元 第36讲 微生物的培养与应用 Word版含解

1．(2020·福建宁德一模)乳酸菌是对人体有益的微生物之一，常用于生产酸奶，其发酵产物为乳酸，能溶解周围环境中的难溶性碳酸钙。回答下列问题：

(1)为检测某品牌酸奶中的乳酸菌含量是否达标，检验人员进行了相关实验。

①配制培养基：培养基中除含水、无机盐、碳源、氮源和琼脂外，还需添加维生素和________。

②稀释样品：取1 mL待测酸奶，用________进行梯度稀释。

③接种培养：用______________法接种，培养时控制的气体条件是________。 ④观察计数：菌落周围出现________的就是乳酸菌的菌落，选择菌落数在________的平板计数。每隔24小时统计一次菌落数目，选取菌落数目稳定时的记录作为结果，目的是________________________________________________________________________。

(2)生产上不能用含有抗生素的牛奶发酵成酸奶，原因是________________。

解析：(1)①乳酸菌的发酵产物乳酸，能溶解周围环境中的难溶性碳酸钙，因此配制培养乳酸菌的培养基除加入水、无机盐、碳源、氮源和琼脂外，还需添加维生素和CaCO3。②计数乳酸菌前，需用无菌水将待测酸奶稀释至合适浓度。③计数乳酸菌需用稀释涂布平板法接种，乳酸菌是厌氧菌，培养时控制的气体条件是无氧。④乳酸能溶解周围环境中的难溶性碳酸钙，不透明的培养基上出现透明(溶钙)圈的就是乳酸菌的菌落。细菌计数时，常选择菌落数在30～300的平板计数。每隔24小时统计一次菌落数目，选取菌落数目稳定时的记录作为结果，目的是可以防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目。(2)生产上不能用含有抗生素的牛奶发酵成酸奶，因为抗生素会抑制乳酸菌的繁殖。

答案：(1)①CaCO3 ②无菌水 ③稀释涂布平板 无氧

④透明圈(或溶钙圈) 30～300 可以防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目 (2)抗生素会抑制乳酸菌的繁殖

2．(2020·河北衡水中学调研)下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌的培养基配方，请结合所学知识，回答下列相关问题：

成分 蛋白胨 乳糖 蔗糖 K2HPO4 显色剂(伊红美蓝) 含量 10.0 g 5.0 g 5.0 g 2.0 g 0.2 g 琼脂 将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL 12.0 g (1)根据用途划分，该培养基属于____________培养基，若要分离能分解尿素的细菌，需对培养基做出的最关键的调整是____________，若还需鉴定分解尿素的细菌，需做出的调整是________________________。

(2)从培养基的成分上看，大肠杆菌的同化类型为____________。该培养基能否用于分离筛选出大肠杆菌？为什么？________________________________________。

(3)在实验室培养微生物时，获得纯净培养物的关键是____________。

(4)某同学尝试纯化大肠杆菌，其中一个平板的菌落分布如右图，推测该同学接种时可能的操作失误是____________。

解析：(1)伊红美蓝是鉴定大肠杆菌的试剂，因此该培养基从用途上划分，应属于鉴别培养基；若要分离能分解尿素的细菌，则需要保证培养基中以尿素为唯一的氮源，即将蛋白胨换成尿素；鉴定分解尿素的细菌，需要使用酚红指示剂。(2)大肠杆菌需要从培养基中获得碳源，因此其同化作用类型是异养型；由于表格中培养基的碳源种类很多，可供多种微生物生存，因此该培养基不能用于分离筛选出大肠杆菌。(3)微生物培养时，关键是防止外来杂菌的污染。(4)由题图可知，接种时该同学采用的是稀释涂布平板法，但菌落比较集中，没有很好地分散开来，可能是涂布不均匀导致的。

答案：(1)鉴别 将蛋白胨换成尿素 将伊红美蓝换成酚红 (2)异养型 不能，因为培养基中的碳源种类很多，可供多种微生物生存 (3)防止外来杂菌的污染 (4)涂布不均匀

3．果醋发酵菌种为醋酸菌，测定发酵液中醋酸菌的数目有利于控制发酵进程。下表是四个生物兴趣小组测定醋酸菌数目的统计结果，分析回答下列问题：

组别 一 二 三 四 平板个数 1 3 3 4 菌落数 240 230、250、240 210、520、250 280、31、270、290 (1)四个小组中，最合理的是第________组，理由是________________________。 (2)分析第三组统计的结果，可能出现的原因有_________________________(答出两条即可)。若进一步分析原因，可以通过观察__________________作出判断。

(3)分析第四组统计的结果，出现这种结果可能的原因有________________________________________________________________________。

解析：(1)微生物计数时，一定要涂布至少三个平板作为重复组，且每个平板上的菌落数应为30～300个。

(2)第三组统计的结果中，有一个平板上的菌落数过多，可能的原因：培养基被杂菌污染、涂布用的菌液稀释倍数错误、接种过程被杂菌污染。若要进一步分析原因，可通过观察菌落的特征作出判断，若菌落一致，则可能是菌落稀释倍数错误，若出现多种菌落，则可能被杂菌污染。

(3)第四组统计的结果中，有一个平板上的菌落数过少，可能的原因：涂布用的菌液稀释倍数错误、涂布平板时涂布器温度过高，杀死菌种。

答案：(1)二 在微生物计数时，一定要涂布至少三个平板作为重复组，且每个平板上的菌落数应为30～300个

(2)培养基被杂菌污染、涂布用的菌液稀释倍数错误、接种过程被杂菌污染 菌落特征 (3)涂布用的菌液稀释倍数错误；涂布平板时涂布器温度过高，杀死菌种

4．酸奶的保质期一般在10天左右，其中乳酸活菌数的含量是衡量酸奶营养价值的一个重要指标。某兴趣小组拟探究温度对酸奶中乳酸菌含量的影响，测得结果如下图所示，回答下列问题：

(1)分离纯化乳酸菌的培养基中含蛋白胨，蛋白胨提供的主要营养有____________________。培养基灭菌常采用________________法。

(2)培养乳酸菌一段时间后，培养基中的pH会下降，原因是________________________________________________________________________。

(3)通过稀释涂布平板法测得的乳酸菌的菌落数比活菌实际数目低的原因是________________________________________________。

(4)根据结果推测乳酸菌更适合贮藏在温度为________的环境，依据是________________________________________________________________________。

解析：(1)培养基中蛋白胨的作用是为微生物提供碳源、氮源和维生素等营养物质。对

培养基的灭菌常采用高压蒸汽灭菌法。(2)培养过程中乳酸菌可将葡萄糖分解成乳酸，乳酸积累会引起培养基的pH下降。(3)由于两个或多个细胞连在一起时，在培养基上只能形成一个菌落 ，所以通过稀释涂布平板法测定的菌落数比活菌实际数目低。(4)由题图曲线可知，乳酸菌在7 ℃时比较适合贮藏，因为在此温度下，乳酸菌10天内始终保持一定的活菌数。

答案：(1)碳源、氮源和维生素 高压蒸汽灭菌 (2)乳酸菌通过无氧呼吸产生的乳酸进入培养基中 (3)当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落

(4)7 ℃ 在此温度下，乳酸菌10 d内始终保持一定的活菌数

5．纤维素酶在生物燃料制作、布料处理中起重要作用。目前，利用微生物提高纤维素酶产量是主要发展方向。下图甲用紫外线照射含有纤维素分解菌的土样，分离、培养，再检测各菌株的纤维素酶的产生量。回答下列相关问题：

(1)紫外线照射的目的是________________________________________，A0组未经紫外线处理，其作用是作为________。

(2)经高压灭菌锅灭菌的培养基，需要冷却后才能用来倒平板。常用于估计培养基已冷却到50 ℃左右的简便方法为________________________________。

(3)上述培养皿中的培养基除含有水和无机盐、酵母膏、水解酪素、琼脂等外，还应有________，目的是选择纤维素分解菌。

(4)上述检测结果如图乙所示。由图可知，________组酶含量与A0组相同，最可能的原因是________________________________。

解析：(1)紫外线属于诱发基因突变的物理因素，通过紫外线照射后细菌突变频率大大提高，从而可能筛选出符合人们需要的高产菌株；A0组未经紫外线处理，为对照组。(2)用手触摸盛有培养基的锥形瓶刚刚不烫手时的温度是50 ℃左右。(3)以纤维素作为唯一碳源的