市园林科研所植物组织培养实施方案

市园林科研所植物组织培养实施方案

植物组织培养技术应用于高附加值以及珍稀观赏苗木的繁殖与育种，将会取得巨大的经济效益、社会效益和生态效益，为了组建自己的植物组织室，充分利用现有条件，现制定植物组织培养实施方案如下： 一、植物组织培养实验室组成与设计

一个标准的组织培养实验室应当包括洗涤室、?配置室、无菌室、培养室、观察室等。在实际中可结合可行条件，合并一部分。根据现有场地，设置洗涤配置室、无菌接种室、培养观察室，将苗圃办公楼三楼西侧一个房间利用滑动门分隔成洗涤配置室、无菌接种室，隔壁房间作为培养观察室，门口走廊进行封闭用作缓冲间。 1、洗涤配置室

洗涤配置室主要用于玻璃器皿和其它仪器的清洗、干燥以及培养基的制备工作。需备有工作台面、上水管和下水管、水池、落水架、电源、干燥箱等，用于培养容器、玻璃器皿、用具和培养材料的清洗；配备1/100普通天平和1/10000的电子天平用于称量。室内配有各种试管、三角瓶、烧杯、量筒、移液器等器皿用于培养基的配制、分装；有平面实验台以及安放药品和器皿的各类药品柜、器械柜、物品存放架；有水浴锅、电饭锅、微波炉、过滤装置、酸度计、分注器以

及贮藏母液的冰箱等；室内需备有高压灭菌锅、细菌过滤装置、煤气灶和电炉用于器皿、器械、封口材料和培养基的消毒灭菌。 2、无菌接种室

无菌接种室是进行植物材料的分离接种及培养物转移的一个重要操作室。无菌操作室应设有缓冲间，面积2 m2为宜，也需要装自来水和紫外灯，进入无菌操作室前在此更衣换鞋，以减少进出时带入杂菌。一般安装滑动门使空气不致流动，以防外界菌及尘埃的侵入；室内应安装紫外灯，以便灭菌；室内有超净工作台、移动式载物台、广口瓶、试管、三角瓶、酒精灯、接种工具等。

应配备接种箱、紫外灭菌灯、超净台、解剖镜、搁架、空调等。 3、培养观察室

培养观察室是将接种的材料进行培养生长的场所。应配备固定式培养架、控温、控光设备。培养室要保持一定的温度条件，大多数情况保持在20~27℃，要求湿度也要求恒定，相对湿度保持70%~80%为好，可用空调机或调湿机来控制。 二、器材 1、玻璃器皿

在组织培养中配制培养基和进行培养需大量的玻璃器

皿。 要求由碱性溶解度小的硬质玻璃制成， 以保证长期贮存药品及培养的效果，根据培养的目的和要求，可以采用不同种类、规格的玻璃器皿.其中以试管、三角瓶、培养皿等使用较多。

最常使用的是三角瓶，规格有100、250、500毫升等， 一般使用100毫升三角瓶，无论静止或振荡培养皆适用。其培养面积大， 利于组织生长，受光也比试管好。由于瓶口较小，亦不易污染。

培养皿常用9、12厘米直径等规格，要求上、下能密切吻合。这在游离细胞、 原生质体、花粉等的静置培养、看护培养、无菌种子的发芽、植物材料的分离等都需采用。

试管常用口径18×180 mm或20×200mm规格。可用于培养较高的试管苗 ，另外也不易污染。

计量容器用于配制培养基时定容，主要有容量瓶、移液管、量筒 2、器械用具

主要采用医疗上用的镊子。可用２０厘米长的镊子。某些微小部分的精细操作则用钟表镊子， 如在分离茎尖幼叶时，由于其尖端锋利，所以几乎可代替剪刀使用。可采用五官科用的中型剪刀。主要用于切断茎段、叶片等。切割较小材料时可用解剖刀。解剖针用于深入到培养瓶中，转移细胞或愈伤组织。也可用于分离微茎尖的幼叶。

三、 组培试剂

无机盐、维生素、氨基酸、糖类、琼脂、生长调节物质等 四、项目（课题）经费预算表 项目总需经费 （万元） 偿还总金额 （万元） 其它经费来源 55万元 预算支出科目 1.设备购置费 自筹 26 金额：万元 9 立式高压灭菌锅、超净工作台（双人）、培养架、加湿器、蒸馏水发生器、空 调器等组培仪器、设备 2.基本建设费 3.培养基制备费 8 无机、有机营养元素、激素、琼脂、蔗糖等 4 建立洗涤配置室、无菌室、培养室等 2007年 8万元 银行贷款 其中 2008年 7万元 年 万元 41 申请市科研经费 （万元） 15 其它部门拨款或筹集 单位： 金额： 计 算 依 据 及 理 由