2020高考生物江苏专用提分大二轮复习讲义：专题六 生物技术与工程 第1讲 Word版含答案

防止冷凝水落入培养基造成污染，C正确；在固体培养基表面可形成单菌落，故菌种的分离和菌落的计数可以使用固体培养基，D正确。

2．(2019·南京、盐城第二次模拟)下列有关微生物培养的叙述，错误的是(多选)( ) A．涂布接种时，需将涂布器沾酒精后在酒精灯外焰上引燃，冷却后再使用 B．纯化培养时，培养皿应倒置放在恒温培养箱内的摇床上培养 C．分离计数时，可用稀释涂布平板法对需计数的微生物进行分离 D．观察菌落时，应将培养皿盖拿掉以利于看清菌落的形态特征 答案 BD

解析 涂布接种时，将涂布器末端浸在盛有酒精的烧杯中，取出时，要让多余的酒精在烧杯中滴尽，然后将沾有酒精的涂布器在火焰上引燃，A项正确；纯化培养时，不能用摇床培养，B项错误；可以用稀释涂布平板法对微生物进行分离计数，C项正确；观察菌落时，不能拿掉培养皿，D项错误。故选BD。

3．(2019·全国Ⅲ，37)回答下列与细菌培养相关的问题。

(1)在细菌培养时，培养基中能同时提供碳源、氮源的成分是________(填“蛋白胨”“葡萄糖”或“NaNO3”)。通常，制备培养基时要根据所培养细菌的不同来调节培养基的pH，其原因是___________________________________。硝化细菌在没有碳源的培养基上_______(填“能够”或“不能”)生长，原因是________________________________________________。 (2)用平板培养细菌时一般需要将平板________(填“倒置”或“正置”)。

(3)单个细菌在平板上会形成菌落，研究人员通常可根据菌落的形状、大小、颜色等特征来初步区分不同种的微生物，原因是____________________________________________________ _______________________________________________________________________________。 (4)有些使用后的培养基在丢弃前需要经过________处理，这种处理可以杀死丢弃物中所有的微生物。

答案 (1)蛋白胨 不同细菌生长繁殖所需的最适pH不同 能够 硝化细菌可以利用空气中的CO2作为碳源 (2)倒置 (3)在一定的培养条件下，不同种微生物表现出各自稳定的菌落特征 (4)灭菌

解析 (1)细菌培养时常用牛肉膏蛋白胨培养基，牛肉膏能提供碳源、氮源、磷酸盐、维生素，蛋白胨能提供碳源、氮源、维生素，而葡萄糖不能提供氮源，NaNO3不能为微生物提供碳源。不同细菌生长繁殖所需要的最适pH是不同的，应该根据培养细菌的不同来调节培养基的pH。硝化细菌是化能自养型细菌，可以空气中的CO2为碳源，因此在没有碳源的培养基上能够生长。(2)在平板培养基上培养细菌时，一般需将平板倒置，这样可以防止皿盖上的水珠落入培养基。(3)不同种类的细菌所形成的菌落，在大小、形状、光泽度、颜色、硬度、透明度等方面具有一定的特征，不同种细菌在一定培养条件下表现出各自稳定的菌落特征，可以作为菌种鉴定的重要依据。(4)使用后的培养基在丢弃前需进行灭菌处理，以免污染环境。

考向二 微生物的分离和计数

4．(2019·江苏，19)下列关于产纤维素酶菌分离及运用的叙述，不合理的是( ) A．筛选培养基中应含有大量的葡萄糖或蔗糖提供生长营养 B．可从富含腐殖质的林下土壤中筛选产纤维素酶菌

C．在分离平板上长出的菌落需进一步确定其产纤维素酶的能力 D．用产纤维素酶菌发酵处理农作物秸秆可提高其饲用价值 答案 A

解析 产纤维素酶菌能利用纤维素，故筛选培养基应以纤维素作为唯一碳源，A项错误；富含腐殖质的林下土壤中含有较多的能分解纤维素的产纤维素酶菌，B项正确；用筛选培养基分离得到的菌落只是初步筛选，还需进一步确定其产纤维素酶的能力，C项正确；用产纤维素酶菌发酵处理农作物秸秆，动物食用后更容易消化吸收，故可提高其饲用价值，D项正确。 5．(2019·全国Ⅰ，37)已知一种有机物X(仅含有C、H两种元素)不易降解，会造成环境污染。某小组用三种培养基筛选土壤中能高效降解X的细菌(目标菌)。 Ⅰ号培养基：在牛肉膏蛋白胨培养基中加入X(5 g/L)。

Ⅱ号培养基：氯化钠(5 g/L)，硝酸铵(3 g/L)，其他无机盐(适量)，X(15 g/L)。 Ⅲ号培养基：氯化钠(5 g/L)，硝酸铵(3 g/L)，其他无机盐(适量)，X(45 g/L)。 回答下列问题：

(1)在Ⅰ号培养基中，为微生物提供氮源的是__________________。Ⅱ、Ⅲ号培养基中为微生物提供碳源的有机物是________。

(2)若将土壤悬浮液接种在Ⅱ号液体培养基中，培养一段时间后，不能降解X的细菌比例会____________，其原因是___________________________________________________。 (3)Ⅱ号培养基加入琼脂后可以制成固体培养基，若要以该固体培养基培养目标菌并对菌落进行计数，接种时，应采用的方法是__________________。

(4)假设从Ⅲ号培养基中得到了能高效降解X的细菌，且该菌能将X代谢为丙酮酸，则在有氧条件下，丙酮酸可为该菌的生长提供________和__________________。

答案 (1)牛肉膏、蛋白胨 X (2)下降 不能降解X的细菌因缺乏碳源不能增殖，而能降解X的细菌能够增殖 (3)稀释涂布平板法 (4)能量 合成其他物质的原料

解析 (1)牛肉膏蛋白胨培养基中，牛肉膏、蛋白胨为微生物生长提供了氮源，而Ⅱ号、Ⅲ号培养基中除X外的其他物质均不含碳，所以能为微生物提供碳源的有机物是X。(2)因为Ⅱ号培养基中碳源只有X，属于选择培养基，只有能降解X的细菌才能增殖，而不能降解X的细菌因缺乏碳源不能增殖。(3)要对菌落进行计数，应采用稀释涂布平板法进行接种。(4)在有氧条件下，丙酮酸参与细菌的有氧呼吸，可以为该菌的生长提供能量和合成其他物质的原料。 6．(2019·南京、盐城5月模拟)刚果红能够与纤维素形成红色复合物，可用其鉴定纤维素分解菌。某研究小组将滤纸埋在土壤中，30天后从滤纸上取6 g土壤样品加入30 mL生理盐水中

溶解，得到了富有纤维素分解菌的菌原液，并进行如下实验，回答下列问题：

(1)稀释菌原液：为确定合适的稀释倍数，小组成员取1 mL菌原液进行如下图所示的操作，在统计菌落时，发现平板上的平均菌落数为40个，则每毫升菌原液中的细菌数大约为__________个。

(2)培养基的准备：在对培养基进行高压蒸汽灭菌的过程中，完成加水、装锅、加热排气、保温保压适当时间后，切断热源，让灭菌锅内温度自然下降，___________________________，打开排气阀，旋开固定螺栓，开盖，才可以取出灭菌的培养基等物品。待培养基冷却至50 ℃左右时倒平板，在培养基凝固之前加入灭菌的刚果红，从功能上来看，该培养基属于________培养基，培养基中碳源主要是________。

(3)接种与观察：在无菌条件下，用________取0.1 mL稀释后的菌悬液进行图1中________所示的操作，室温放置2～3分钟后倒置于恒温箱中培养，室温放置2～3分钟的目的是____________________。培养过程中定期观察菌落特征和透明圈的大小，图2中D/d的值越________，表示该菌对纤维素分解能力越强。

答案 (1)4×106 (2)压力表的压力降为零 鉴别 纤维素 (3)移液枪(移液管) 甲 使菌液完全被培养基吸收 大

解析 (1)分析题图可知菌原液被稀释了10 000倍，每毫升菌原液中的细菌数大约为40×10×10 000＝4×106个。

(2)培养基的准备：在对培养基进行高压蒸汽灭菌的过程中，完成加水、装锅、加热排气、保温保压适当时间后，切断热源，让灭菌锅内温度自然下降，压力表的压力降为零，打开排气阀，旋开固定螺栓，开盖，才可以取出灭菌的培养基等物品。待培养基冷却至50 ℃左右时倒平板，在培养基凝固之前加入灭菌的刚果红，刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物，故从功能上来看，该培养基属于鉴别培养基，培养基中碳源主要是纤维素。

(3)接种与观察：在无菌条件下，用移液枪(移液管)取0.1 mL稀释后的菌悬液进行图1中甲所示的操作，室温放置2～3分钟后倒置于恒温箱中培养，室温放置2～3分钟的目的是使菌液完全被培养基吸收。培养过程中定期观察菌落特征和透明圈的大小，根据刚果红染色法原理，图2中D/d的值越大，表示该菌对纤维素分解能力越强。

考点二 传统发酵技术的应用

1．理清“3”种传统发酵食品的技术

食品 菌种 呼吸类型 兼性厌氧 有氧 有氧 原理 有氧呼吸大量繁殖，无氧呼吸产生酒精 糖(酒精)→醋酸 蛋白酶、脂肪酶 水解蛋白质、脂肪 温度 18～25 ℃ 30～35 ℃ 15～18 ℃ 果酒 酵母菌 果醋 醋酸菌 腐乳 毛霉等

2.控制杂菌的“四大措施” (1)通过发酵条件控制杂菌

①无氧发酵时的无氧环境可以抑制好氧菌。

②乳酸菌发酵、酒精发酵形成的酸性环境抑制杂菌繁殖。 (2)利用盐控制杂菌：如腐乳的制作。 (3)利用酒精控制杂菌：如果酒、腐乳的制作。 (4)利用香辛料控制杂菌：如腐乳的制作。 3．果酒和果酒的发酵装置分析

装置图 结构或操作 充气口 排气口 长而弯曲的胶管 制酒时

考向一 果酒、果醋和腐乳的制作

7．(2019·江苏，9)下列关于传统发酵技术应用的叙述，正确的是( ) A．利用乳酸菌制作酸奶过程中，先通气培养，后密封发酵 B．家庭制作果酒、果醋和腐乳通常都不是纯种发酵

C．果醋制作过程中发酵液pH逐渐降低，果酒制作过程中情况相反 D．毛霉主要通过产生脂肪酶、蛋白酶和纤维素酶参与腐乳发酵

目的 醋酸发酵时连接充气泵进行充气 酒精发酵时用来排出CO2 防止空气中微生物的污染 关闭充气口 充气口连接气泵，输入无菌空气 制醋时