2020高考生物江苏专用提分大二轮复习讲义：专题六 生物技术与工程 第1讲 Word版含答案

第1讲 生物技术实践

[考纲要求] 1.微生物的分离和培养(B)。2.某种微生物数量的测定(C)。3.微生物的应用(B)。4.酶在洗涤等方面的应用(B)。5.制备和应用固相化酶(A)。6.发酵食品加工的基本方法(A)。7.实验：(1)探究酶在洗涤方面的作用(b)；(2)酵母细胞的固定化技术(b)；(3)腐乳的制作(a)；(4)果酒和果醋的制作(b)；(5)微生物的分离与培养(b)；(6)DNA的粗提取与鉴定(b)。

1．培养基营养成分的分析方法

(1)虽然各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。

(2)在微生物所需要的化合物中需要量最大的是碳源，新陈代谢同化作用类型的划分也是以是否能合成含碳有机物为依据，能合成含碳有机物的是自养型，反之则为异养型。 (3)对异养微生物来说，含C、H、O、N的有机化合物既是碳源又是氮源。 2．微生物的培养和纯化

(1)为了确定培养基的灭菌是否合格，微生物学实验一般会设置空白对照：随机取若干灭菌后的空白平板培养基在适宜条件下培养一段时间，观察培养基上是否有菌落生成。 (2)观察菌落需用固体培养基，因此培养基要添加琼脂。

(3)倒平板的温度一般在50 ℃左右较为适宜，温度过高会烫手，温度过低培养基又会凝固。 (4)平板需倒置，这样既可减少培养基表面的水分挥发，又可防止皿盖上的水珠落入培养基，造成培养基污染。

(5)平板划线法只适用于微生物的提纯，不适合进行计数，并且在最后一次划线的末端处的菌种最纯。

(6)利用稀释涂布平板法的计算公式估算水样中的活菌数：(C÷V)×M，其中C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)，M代表稀释倍数。 (7)菌种可采用甘油管藏法长期保存。 3．利用微生物加工食品的误区

(1)误认为果酒、果醋制作过程中都需要无氧条件。果醋制作过程中，利用醋酸菌的有氧呼吸，因此需要有氧条件。

(2)腐乳制作中加盐既可析出豆腐中的水分，又能抑制微生物的生长。卤汤是由酒和香辛料配制而成的，既能防腐杀菌，又能调味。 4．酶和酵母细胞常用的几种固定方式

①是包埋法，是将酶或者细胞包埋在细微网格里。

②是化学结合法，是将酶或者细胞相互结合或者结合到载体上。 ③是物理吸附法，是将酶或者细胞吸附到载体表面。

1．可以用血细胞计数板直接统计自来水中的大肠杆菌数( )

2．高压蒸汽灭菌加热结束时，打开放气阀使压力表指针回到零后，再开启锅盖( )

3．腐乳制作中，控制发酵温度的主要目的是调味( ) 4．腐乳制作后期加入香辛料和料酒有防腐作用( )

5．果酒发酵中期通入氮气，酵母菌将从有氧呼吸转变为无氧呼吸( ) 6．果醋的发酵周期与实验设定的温度密切相关( ) 7．通常使用液体培养基分离获得细菌单菌落( ) 8．在制作果酒的实验中，将葡萄汁装满整个发酵装置( )

9．用含蛋白酶的洗衣粉去除油渍，效果比其他类型的加酶洗衣粉好( ) 10．CaCl2溶液的作用是使海藻酸钠形成凝胶珠( ) 11．固定化细胞技术在多步连续催化反应方面优势明显( )

答案 1.× 2.× 3.× 4.√ 5.√ 6.√ 7.× 8.× 9.× 10.√ 11.√

1．吃腐乳时，你会发现腐乳外部有一层致密的“皮”。这层“皮”是前期发酵时在豆腐表面上生长的菌丝(匍匐菌丝)，它能形成腐乳的“体”，使腐乳成形。

2．无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还能有效避免操作者自身被微生物感染。

3．在平板划线操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环的目的：操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物；每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端。

4．科学家通过基因工程的方法生产出了能够耐酸、耐碱、忍受表面活性剂和较高温度的酶。 5．海藻酸钠的浓度影响固定化细胞的质量。如果海藻酸钠浓度过高，将很难形成凝胶珠；如果浓度过低，形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞的数目少，影响实验效果。

考点一 微生物的培养、分离与计数

1．无菌操作技术

(1)常用的3种消毒方法——煮沸消毒法、巴氏消毒法及化学药剂消毒法。 (2)常用的3种灭菌方法

①灼烧灭菌——接种环、接种针等金属器具。

②干热灭菌——主要针对玻璃器皿(吸管、培养皿)和金属用具等。 ③高压蒸汽灭菌——主要针对培养基等。

2．平板划线法、稀释涂布平板法及显微镜直接计数法的区别 (1)平板划线法适用于微生物的纯化，但不能用于微生物的计数。

(2)稀释涂布平板法常用于活菌计数，而显微镜直接计数法不能区分菌体的死活。

(3)用稀释涂布平板法进行计数时，为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300间的平板进行计数。

3．选择培养基及鉴别培养基的使用方法

(1)分离纤维素分解菌的实验中先用选择培养基，再用鉴别培养基。选择培养基中无凝固剂，为液体培养基，以纤维素作为碳源的微生物可以正常生长，而其他绝大多数微生物不能正常生长；利用液体培养基能使营养成分充分利用，以增加纤维素分解菌的浓度。

(2)鉴别培养基含琼脂，为固体培养基，可在培养基上形成肉眼可见的菌落。刚果红染色法就是应用的此类培养基。 4．微生物计数的“两”种方法 (1)直接计数法：显微镜直接计数法。

(2)间接计数法：稀释涂布平板法(活菌计数法)，统计的菌落数往往比活菌的实际数目低。

考向一 微生物的培养技术

1．(2019·江苏，12)下列关于微生物实验操作的叙述，错误的是( ) A．培养微生物的试剂和器具都要进行高压蒸汽灭菌 B．接种前后，接种环都要在酒精灯火焰上进行灼烧 C．接种后的培养皿要倒置，以防培养污染 D．菌种分离和菌落计数都可以使用固体培养基 答案 A

解析 培养微生物的培养基一般用高压蒸汽灭菌法灭菌，微生物的接种工具，如接种针、接种环或其他金属用具一般通过酒精灯火焰灼烧来灭菌，A错误；接种前，接种环要在酒精灯火焰上进行灼烧，防止接种环上附着的微生物对实验结果造成干扰，接种后灼烧可以防止微生物扩散，污染接种室或者超净台，影响整体接种环境，B正确；接种后的培养皿要倒置，