选修一 第40讲土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

选修一 第40讲土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

一、选择题

1.(2012乐山模拟)下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是 ( ) A.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、尿素、琼脂、水 B.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、琼脂、水 C.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、尿素、琼脂、水

D.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水

2.产生标准菌落的最初数目和培养基分别是 ( ) A.同种少数细菌,液体培养基 B.许多细菌,液体培养基 C.同种少数细菌,固体培养基 D.许多细菌,固体培养基

3.(2012达州模拟)某同学在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均值为234,那么每克样品中的菌落数是(涂布平板时所用稀释液的体积为0.1 mL) ( ) A.2.34×108 B.2.34×109 C.234 D.23.4

4.(2012自贡模拟)用稀释涂布平板法来统计样品中尿素分解菌的数目,为了提高实验结果的可信度,往往要设置对照实验,对于对照组的要求不包括以下哪项 ( ) A.对照组培养基也要严格灭菌,且不接种任何微生物 B.对照组和实验组培养基放在相同条件下培养 C.所用培养基成分及pH大小完全与实验组一致 D.培养基的量的大小与实验组必须绝对相同

5.(2012北京东城上学期期末检测)下列关于微生物分离和培养的有关叙述,不正确的是 ( ) A.分离土壤中不同的微生物,要采用不同的稀释度 B.测定土壤样品中的活菌数目,常用显微镜直接计数法 C.提纯和分离严格厌氧型微生物,一般不用稀释涂布平板法 D.分离能分解尿素的细菌,要以尿素作为培养基中唯一氮源

6.(2012大连质检)下列说法错误的是 ( ) A.因为土壤中各类微生物数量不同,所以为获得不同类型的微生物,要按不同的稀释倍数进行分离 B.测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量,选用的稀释范围不同

C.只有得到了3个或3个以上菌落数目在30~300的平板,才说明稀释操作比较成功,并能够进行菌落的计数

D.牛肉膏蛋白胨培养基的菌落数明显大于选择培养基菌落数目,说明选择培养基已筛选出一些菌落 7.(2013乐山质检)可以鉴定出分解尿素的细菌的方法是 ( ) A.以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂 B.以尿素为唯一氮源的培养基中加入二苯胺试剂 C.以尿素为唯一氮源的培养基中加入刚果红试剂 D.以尿素为唯一氮源的培养基中加入双缩脲试剂

8.(2011年重庆理综卷)下列有关细菌培养的叙述,正确的是 ( ) A.在琼脂固体培养基上长出的单个菌落含有多种细菌 B.在培养基中加入青霉素可抑制真菌而促进细菌生长 C.向液体培养基中通入氧气能促进破伤风杆菌的生长 D.在半固体培养基中接种细菌培养后可以观察其运动

9．为了检测大肠杆菌在紫外光照射下，某基因是否发生了突变，下列哪种方法正确？ ( ) A 利用限制酶EcoRⅠ对特定序列的识别来检测 B 利用特异性抗体对该基因表达产物进行检测 C 利用DNA水解酶作用的专一性来进行检测 D利用相应的DNA探针进行分子杂交来检测 10．产生每个标准菌落的细菌的最初数目和培养基分别是 ( ) A．一个细菌，液体培养基 B．许多细菌，液体培养基 C．一个细菌，固体培养基 D．许多细菌，固体培养基

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11．某细菌菌株需从环境中摄取现成的亮氨酸（20种氨基酸中的一种）才能生长，此菌株对链霉素敏感（对链霉素无抗性）。科学家用诱变剂处理此菌株，想筛选出表中列出的菌株类型。依据筛选目的，培养基添加物质合理的组别是（注：L—亮氨酸 S—链霉素 “+”—加入 “-”—不加入。如，L-：不加入亮氨酸 S+：加入链霉素） ( ) 筛选目的 筛选出不需要亮筛选出抗链霉素 筛选出不需要亮氨酸、抗组别 氨酸的菌株 的菌株 链霉素的菌株 A L+，S+ L-，S- L+，S- B L-，S- L+，S+ L-，S+ C L-，S+ L+，S+ L-，S- D L+，S- L-，S- L+，S+ 12． 从某种微生物种群中分离出5种单基因突变体（1、2、3、4、5），它们不能合成生长所需的物质G，在合成G的途径中，A、B、C、D、E都是必须的并按一定先后顺序出现的中间产物，但不知这些物质合成G的具体顺序。通过向基本培养基中分别添加这几种物质，再检测它们对各种突变体生长的影响，结果如下： 向培养基中添加的物质 突变体类型 A B C D E G 1 － － － ＋ － ＋ 2 － ＋ － ＋ － ＋ 3 － － － － － ＋ 4 － ＋ ＋ ＋ － ＋ 5 ＋ ＋ ＋ ＋ － ＋ 注：“＋”表示生长；“－”表示不生长。 以下分析正确的是 ( ) A、类型5的基因突变使其丧失合成物质A的能力 B、类型5的基因突变使其丧失合成物质B的能力

C、类型2的基因突变使其丧失合成物质C的能力 D、类型2的基因突变使其丧失合成物质D的能力

13．(2011年松原高二检测)土壤中的细菌能分解尿素，是因为它们能合成一种 ( ) A．尿素酶 B．脲酶 C．蛋白酶 D．肽酶

14．在培养基中加入尿素(惟一氮源)，以分离出能分解尿素的细菌，这种加入尿素的培养基在功能上属于 ( ) A．选择培养基 B．固体培养基 C．液体培养基 D．半固体培养基 15．实验测定链霉素对3种细菌的抗生素效应，用3种细菌在事先准备好的琼脂平板上画3条等长的平行线(3条线均与图中的链霉素带接触)，将平板置于37 ℃条件下恒温培养3天，结果如图所示。从实验结果分析，以下叙述不正确的是 ( ) ．A．链霉素能阻止结核菌的生长

B．链霉素对结核菌比对霍乱菌更有效 C．链霉素对结核菌比对伤寒菌更有效 D．链霉素可以用于治疗伤寒病人

16．测定土壤中细菌数量一般选用104、105和106倍的稀释液进行平板培养，而测定真菌的数量一般选用102、103和104倍稀释，其原因是 ( ) A．细菌个体小，真菌个体大 B．细菌易稀释，真菌不易稀释 C．细菌在土壤中数量比真菌多 D．随机的，没有原因

17．用来判断选择培养基是否起到了选择作用需要设置的对照是 ( ) A．未接种的选择培养基新课标 第一 网 B．未接种的牛肉膏蛋白胨培养基 C．接种了的牛肉膏蛋白胨培养基 D．接种了的选择培养基

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18.某同学在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均值为234，那么每克样品中的菌落数是(涂布平板时所用稀释液的体积为0.1mL)? ( ) A．2.34×108 B．2.34×109 C．234 D．23.4

19.下列关于测定土壤中细菌数量的叙述，正确的是 ( ) A．一般选用103～107倍的稀液分别涂布

B．测定放线菌的数量，一般选用103、l0 4和105倍稀释 C．测定真菌的数量，一般选用103、104和105倍稀释

D．当第一次测量某种细菌的数量，可以将101～107倍的稀释液分别涂布到平板上培养

20．在做土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验时，甲组实验用氮源只含尿素的培养基，乙组实验用氮源除尿素外还含硝酸盐的培养基，其他成分都相同，在相同条件下操作，培养与观察，则乙组实验属于 ( ) A．空白对照 B．标准对照 C．相互对照 D．条件对照 二、非选择题

21.(2012年浙江自选模块)幽门螺杆菌(Hp)感染是急慢性胃炎和消化性溃疡的主要致病因素。在患者体内采集样本并制成菌液后,进行分离培养。实验基本步骤如下: 配制培养基→灭菌、倒平板→X→培养→观察 请回答: (1)在配制培养基时,要加入尿素和酚红指示剂,这是因为Hp含有 ,它能以尿素作为氮源;若有Hp,则菌落周围会出现 色环带。

(2)下列对尿素溶液进行灭菌的最适方法是 灭菌。

A.高压蒸汽 B.紫外灯照射 C.70%酒精浸泡 D.过滤

(3)步骤X表示 。在无菌条件下操作时,先将菌液稀释,然后将菌液 到培养基平面上,菌液稀释的目的是为了获得 菌落。

(4)在培养时,需将培养皿倒置并放在 中。若不倒置培养,将导致 。 (5)临床上用14C呼气试验检测人体是否感染Hp,其基本原理是Hp能将14C标记的 分解为NH3和14

CO2。

22.(2012南充模拟)为了探究土壤中的微生物对尿素是否有分解作用,设计了以下实验,并成功筛选到能高效降解尿素的细菌(目的菌)。培养基成分如下表所示,实验步骤如下图所示。请分析回答问题: KH2PO4 Na2HPO4 MgSO4·7H2O 葡萄糖 尿素 琼脂 1.4 g 2.1 g 0.2 g 1 g 10 g 15 g 将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到1 000 mL (1)简述土壤中可分解尿素的细菌的鉴定方法及原理: 。 (2)培养基中加入尿素的目的是筛选 ,这种培养基属于 培养基。

(3)“目的菌”生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的 和 ,实验中需要振荡培养,原因是 。 (4)转入固体培养基时,常采用 接种,获得单菌落后继续筛选。

(5)实验结束后,使用过的培养基应该进行 处理后,才能倒掉。 23．某同学在做微生物实验时，不小心把圆褐固氮菌和酵母菌混在一起。该同学设计下面的实验，分离得到纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌。

(1)实验原理：圆褐固氮菌是自生固氮菌，能在无氮培养条件下生长繁殖而酵母菌则不能；青霉素不影响酵母菌等真菌的生长繁殖，而会抑制圆褐固氮菌的生长繁殖。 (2)材料用具：(略) (3)实验步骤

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①制备两种培养基，将两种培养基各自分成两份，依次标号A、a和B、b。 ②________________________________________________________，并在25 ℃条件下培养____天。 ③分别从A、B培养基的菌落中挑取生长良好的菌并分别接种到a、b培养基中，适宜条件下培养3～4天。

(4)请问答 ： ①本实验中，配制的分离用的培养基成分特点：A、a是__________培养基，B、b是__________培养基，根据上述原理配制的培养基属于__________培养基。

②根据所需目的配制上述培养基时除营养要协调外还应注意____________________________。 ③实验步骤中第③步的目的是__________________________ __________________。 ④圆褐固氮菌与酵母菌在结构上的主要差异为__ _____________________。 ⑤青霉素抑制圆褐固氮菌等细菌的生长繁殖，其作用机理是破坏或抑制其细胞壁的形成。请据此推测不影响酵母菌等真菌生长繁殖的原因是_________________________ _________。 24.（2013四川卷）由于酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，有人将地衣芽孢杆菌的α-淀粉酶基因转入酵母菌中经筛选得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种（过程如图甲所示）。

（1）图甲中，过程①需要的酶有_____________。为达到筛选目的，平板内的固体培养基应以____________作为唯一碳源。②、③过程需要重复几次，目的是______________。

（2）某同学尝试过程③的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图乙所示。该同学的接种方法是_____________________；推测该同学接种时可能的操作失误是______________。

（3）以淀粉为原料，用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的适宜条件下密闭发酵，接种________菌的发酵罐需要先排气，其原因是__________________________。

（4）用凝胶色谱法分离α一淀粉酶时，在色谱柱中移动速度较慢的蛋白质，相对分子质量较________。

8．(2010·重庆理综)炭疽病是由炭疽杆菌引起的一种人畜共患传染病。炭疽杆菌两端截平、呈竹节状排列，菌落呈卷发状。对炭疽病疑似患者，可根据噬菌体的宿主专一性，通过实验确诊。 (1)细菌培养：采集疑似患者的样本，分离培养，获得可疑菌落。 (2)细菌鉴定：实验流程如下图所示

①对配制的液体培养基等需采取________方法灭菌；实验所用液体培养基的碳源为________(填“无机碳”或“有机碳”)。

②挑选可疑菌落制片后，用________观察，可看到呈竹节状排列的杆菌。 ③接种可疑菌后，35 ℃培养24小时，液体培养基变浑浊，原因是________。对照组试管中应加入________，与实验组同时培养6小时后，若实验组液体培养基的浑浊度比对照组________(填“高”或“低”)，则可明确疑似患者被炭疽杆菌感染；反之则排除。 ④ 对排除的疑似患者及易感人群，可接种炭疽杆菌疫苗，刺激机体产生相应抗体。与产生抗体相关的细胞除T细胞、B细胞外，还有________。

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