当前位置:首页 > 第一章血痕检验(Bloodstain inspection)
血痕检验中,判定出血部位有重要意义。但单纯血痕难以判断出血部位,只有血痕中混有组织细胞时,根据细胞形态特征判断是何种组织细胞,籍以推测出血部位。检验时,可利用种属试验中盐水浸液的残渣,涂片染色镜检。鼻出血时可见纤毛柱状上皮细胞,偶见鼻毛;口腔出血可见扁平上皮细胞,有时可见食物残渣; 肺出血可见纤毛柱状上皮细胞及口腔扁平上皮细胞; 胃出血可见食物残渣、胃粘膜及口腔上皮细胞;内脏损伤出血含有脏器及组织碎片,镜检时可见脏器特有的细胞;阴道出血可见阴道上皮细胞,偶见阴道滴虫、包皮垢干菌;月经血可见子宫内膜细胞、 阴道或宫颈鳞状上皮细胞。 因女性生殖器出血也可见这些细胞,故判断是否月经血常需用其他方法证明, 如检验纤维蛋白降解产物及纤溶酶活性等。
(二)出血量的测定 (The determination of the amount of bleeding) 出血量的测定有助于判断尸体所在的现场是否原始现场或推测死前挣扎的时间等。测定方法如下:
1.重量计算 剪取含血检材与无血检材各一块,大小相等。室温干燥后,再放入干燥器内,使呈恒量,准确称量每块的重量,两者相差就是干血量。由于鲜血变为干血的重量比率是1000:211,则血量计算公式为:血量=干血量×1000/211。计算血痕的总面积为剪下血痕面积的多少倍,则总出血量=血量×倍数。
2.分光光度计测定法 将一定大小的干血痕溶于定量蒸馏水内,陈旧血痕可用1-5mol/L氢氧化钾溶解。取1ml血痕浸液于吸收管底部,加入砒啶-氢氧化钠溶液(砒啶100ml,10%氢氧化钠30ml,蒸馏水加至300ml)3ml,用小玻璃棒搅匀,便形成氧化砒啶-血色原,这是较稳定的化合物。再加过量固体硫代硫酸钠,便形成还原血色原, 该物质不稳定, 只存在5-10min, 在波长557.5nm 或540nm 测定光密度,根据预先制好的结晶血红素标准曲线查得结晶血红素克数。用系数25.2乘以结晶血红素克数便得1ml斑痕浸液的血红蛋白克数。 再乘浸液总量(ml) 便是斑痕浸液的血红蛋白量。假设 100ml 血中含 14g 血红蛋白,则血液量=斑痕浸液血红蛋白量×100/14。 而全部斑痕血液量=已测斑痕血液量×全部斑痕面积/ 已测斑痕面积。出血量的测定要及时,时间越长,误差越大。
(三)出血时间的测定 (The determination of bleeding’s beginning)
血痕的陈旧度测定在某些案件中也很有意义。测定血痕陈旧度主要根据各种血液成分的变性和血清氯渗润基质的宽度,受时间推移的影响及其他因素,如热、阳光、水洗、腐败等的影响,一般只能作粗略估计。
第二节 血液及血痕检验案例
(The cases that related to blood an bloodstain)
血液(痕)是法医物证学检验中使用最早和最多的生物检材,因此研究也最为完善。
案例一(Case One) 【案情简介】Case summary
某年某月某日,死者吴某下晚自习骑自行车回家路上被迎面驶来的一车辆撞击致死。事故发生后,肇事车辆逃逸。案发后,当地交警经过调查,发现车牌号为×××××某大货车有肇事嫌疑,交警扣留了该车辆并对该车辆进行勘验。通过对嫌疑车辆的勘验,仅在嫌疑车辆左后轮花纹处发现少许灰黑色的不规则物质,送法医物证实验室进行检验鉴定。(Select some irregular substances on the left rear wheel of suspect car to do the inspection.) 【实验室检验】Laboratory inspections
(1) 肉眼检查(Visual Inspection)
在嫌疑车辆左后轮花纹处发现少许灰黑色的不规则物质。
(2)预试验-联苯胺实验(Benzidine test) 联苯胺实验结果为阴性反应。 (3)种属鉴定-对流免疫电泳法(Species identification) 取少量疑似组织匀浆进行抗人血清对流免疫电泳法进行种属鉴定,结果为阳性反应,说明该组织是人体组织。取少许放显微镜下观察,该提取物具有组织学结构,即确定该提取物为人体组织。
(4)个人识别-DNA分析(Personal identification-DNA analysis) 分析从吴某身上提取的皮肤组织与嫌疑车辆左后轮花纹处提取物的人类基因组15个STR基因座的基因型,结果显示该嫌疑车辆左后轮上的提取物与死者吴某的皮肤组织在这15个STR基因座中具有相同的STR分型。
在证据面前,驾驶员交待了肇事经过。对犯罪事实公认不讳。 【启示】Conclusion
联苯胺实验是一种方便快捷、灵敏度高的血痕预试验,其目的是要从大量的可疑血痕中筛除非血痕检材。联苯胺实验的意义在于阴性结果,阴性结果可以否定血痕。本案例中联苯胺实验出现阴性反应,可排除血痕。为什么明明是人体组织会出现这种情况?因为联苯胺实验是利用血痕中的血红蛋白或正铁血红素具有过氧化物酶活性,使过氧化氢释放出新生态氧,将无色联苯胺氧化为联苯胺蓝。联苯胺实验是检测血红蛋白或正铁血红素的,如果被检的人体组织不含有血液成分,联苯胺实验会出现阴性反应。
本案例对一起交通事故中嫌疑车辆左后轮花纹处提取的疑似组织做联苯胺实验阴性,种属鉴定阳性、人类基因组15个STR基因座的基因型分析,并作出了同一认定。说明该检材为人体组织,同时又不含有血液成分,这种情况非常少见,可能是因为该组织来源于血管含量稀疏的脂肪或脑组织,在受到创伤分离时,由于交通事故车辆轮胎速度特别快,组织从人体迅速分离,没有沾上血液成分,或者表面沾上的血液成分由于雨水等的冲刷而丢失,导致联苯胺实验出现阴性结果。因此,在实验室工作中特别是现场勘查做初步检验这类检材时不能轻易地因为预试验阴性而放弃进一步检验,以致于失去侦破案件的机会。对此类的案件一定要带回实验室进行进一步的检验或用多种方法进行检验。 案例二 Case two
【案情简介】Case summary
2005年3月5日,某县一单位被盗,现场勘验时发现在单位大门口的地上有蚕豆大小的疑似血痂状物,提取该疑似血痂状物,放入一垫有棉花的纸盒里,以防止血痂状物破碎,影响检验。室温保存,送实验室进行检验。(A suspicious bloodstain in a theft cases.) 【实验室检验】Laboratory inspections
(1) 肉眼检查(Visual Inspection):
现场提取物为蚕豆大小、呈灰褐色的疑似血痂状物。 (2)预试验-联苯胺实验(Benzidine test):联苯胺实验阳性。
(3)种属鉴定-抗人血红蛋白胶体金实验 (Species identification- Anti-human hemoglobin colloidal gold experiment): 抗人血红蛋白(Hb)胶体金实验阴性。不能确定为人血痕。
(4)个人识别-DNA分析(Personal identification-DNA analysis) 使用Chelex-100法提取疑似血痂的DNA进行人基因组STR基因座分析,未检测到扩增产物。重新取疑似血痂状物采用有机法结合Chelex-100法提取人血痂的DNA进行人基因组STR基因座分析,结果得到一男性STR基因座基因分型图,将数据输入DNA数据库,同时串并上九起跨县区作案的盗窃案。 【启示】Conclusion
本案联苯胺实验阳性反应,仅表示可能是血,还需要进一步做种属鉴定才能确定是否人血痕。但本案种属鉴定-抗人血红蛋白胶体金实验呈阴性反应,可能是由于血液滴落到泥土,与泥土中某些物质发生反应或血红蛋白已降解,所以用种属鉴定没有检测到血红蛋白。使用Chelex-100法提取疑似血痂的DNA进行人基因组STR基因座分析,未检测到扩增产物,是由于血液滴落到泥土里,血痂里混有泥土里的杂质,提取的DNA纯度较差,没有得到扩增产物。重新取疑似血痂状物采用有机法结合Chelex-100法提取人血痂的DNA,得到的DNA纯度较高。因为用有机法提取DNA有纯化DNA的作用,可以得到高纯度的DNA。好的DNA模板,使PCR反应得以进行,获得扩增产物使我们能检测到STR基因型而进行个人识别。
案例三(Case three) 【案情简介】Case summary
2006年10月5日,某县公安局110指挥中心接到电话报称:在县供销社的小区有人持刀杀人,把人砍伤,请来处理。接到报警后,110民警立即赶到现场,此时,120医护人员已在现场对伤者何某、杨某、刀某进行初步处理,随后又将三名伤者送往县医院进行抢救。当天16时30分许,何某和杨某二人抢救无效死亡,刀某处于昏迷状态正在抢救中。
某市公安局接到报案后,立即组织刑侦支队技术人员第一时间赶赴现场,对现场、尸体、伤者进行了初步勘查和检验,发现现场已遭到严重破坏,经检验,死者杨某的损伤主要集中于头部、胸部,有砍创、打击伤等,从其损伤的部位、严重程度来看,可确定不能自己形成,系他人所为。死者何某的的损伤主要集中于头部,其腹部有一锐器创,从其损伤的部位、严重程度来看,可确定不能自己形成,系他人所为。检验伤者刀某的伤势、结合X光片和刀某依然处于昏迷状态
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