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中试分析室发酵工段检验规程
1．低糖、高糖检测规程 1.1 检验规则
1.1.1取样
1.1.1.1 取样点：储糖罐
1.1.1.2 取样方法：整批糖全部收完后，进行吹风，均匀后取样。 1.1.1.3 取样量： 50ml左右
1.1.2检测频次：低糖1次/每班；高糖1次/每班。 1.2检验方法
1.2.1 糖含量检测方法
1.2.1.1测定原理：以甲、乙液为基础，用葡萄糖溶液滴定斐林试剂，使葡
萄糖将斐林试剂中的Cu2+还原，当Cu2+完全被还原后，稍过量的葡萄糖溶液就会进一步将指示剂亚甲基蓝还原，使溶液由蓝色变为无色，从而使葡萄糖溶液体积耗用数转化为还原糖当量。
1.2.1.2试剂：还原糖甲液；还原糖乙液（14g/l）；0.1%糖液。
1.2.1.3仪器：10ml全自动滴定管；5ml大肚吸管；1ml大肚吸管；250ml三
角瓶；1000ml试剂瓶；250ml容量瓶；洗耳球；玻璃珠。
1.2.1.4操作：
①用1ml大肚吸管准确吸取1ml糖液，移入250ml容量瓶中，加蒸馏水稀释至刻度，摇匀，备用。
②用5ml大肚吸管准确吸取斐林氏甲、乙液各5ml于250ml三角瓶内（加入3-4粒玻璃珠），摇匀，再用大肚吸管加入5ml稀释好的样液，混匀放在电炉上，加入一定量标准葡萄糖液（最好距离滴定点0.3ml），待沸腾后，以4～5秒/滴的速度滴至至溶液蓝色消失（无色）为终点。
③记录所用标准葡萄糖液体积。反复测定2~3次，以同样值为最终测定结果。
④空白测定：测定时不加样品，测定过程不变，与以上相同。
1.2.1.5计算：g/dl=[(V1-V2)×0.1/V3]×稀释倍数 其中：V1: 空白滴定时耗标准葡萄糖液的体积（ml）
V2: 样品滴定时耗标准葡萄糖液的体积（ml） V3: 取样体积（ml） 0.1：为标准葡萄糖浓度 1.2.1.6允许误差：
①低糖：0.25 ②高糖：0.5
1.2.2 透光、糊精检测方法
1.2.2.1测定原理：
1.2.2.2试剂：99.9%无水乙醇；糖液。
1.2.2.3仪器：15ml直管；2ml直管；18X180试管；洗耳球；581光电比色
计。
1.2.2.4操作：
①透光：用糖液直接进行测量。
②糊精：用15ml直管准确吸取14ml无水乙醇，移入18X180试管中，用2ml直管准确吸取2ml糖液加入试管中，摇匀，备用。 ③把试液装入比色皿内，用42型滤光片进行测量。
④记录仪器所显示的数据，反复测定2~3次，以同样值为最终测定结果。
1.2.2.5允许误差：1.0
2．二级培养基检测规程 2.1 检验规则
2.1.1取样
2.1.1.1 取样点：二级配料池
2.1.1.2 取样方法：二级配料完毕后，进行吹风，均匀后取样。 2.1.1.3 取样量： 100ml左右 1.1.2检测频次： 1次/每班 2.2检验方法
2.2.1 糖含量检测方法
2.2.1.1测定原理：以甲、乙液为基础，用葡萄糖溶液滴定斐林试剂，使葡
萄糖将斐林试剂中的Cu2+还原，当Cu2+完全被还原后，稍过量的葡萄糖溶液就会进一步将指示剂亚甲基蓝还原，使溶液由蓝色变为无色，从而使葡萄糖溶液体积耗用数转化为还原糖当量。
2.2.1.2试剂：还原糖甲液；还原糖乙液（14g/l）；0.1%糖液。
2.2.1.3仪器：10ml全自动滴定管；5ml大肚吸管；1ml直管；250ml三角瓶；
1000ml试剂瓶；50ml容量瓶；洗耳球；玻璃珠。
2.2.1.4操作：
①用1ml直管准确吸取1ml试液，移入50ml容量瓶中，加蒸馏水稀释至刻度，摇匀，备用。
②用5ml大肚吸管准确吸取斐林氏甲、乙液各5ml于250ml三角瓶内（加入3-4粒玻璃珠），摇匀，再用大肚吸管加入5ml稀释好的样液，混匀放在电炉上，加入一定量标准葡萄糖液（最好距离滴定点0.3ml），待沸腾后，以4～5秒/滴的速度滴至至溶液蓝色消失（无
色）为终点。
③记录所用标准葡萄糖液体积。反复测定2~3次，以同样值为最终检测结果
3.1 种子液检验规则
3.1.1取样
3.1.1.1 取样点：二级种子罐
3.1.1.2 取样方法：先打开风阀进行吹风，约1分钟左右关闭，打开取样考
克进行取样。
3.1.1.3 取样量： 25ml左右 3.1.2检测频次：12次/每班。 3.2检验方法
3.2.1 糖含量检测方法
3.2.1.1测定原理：以甲、乙液为基础，用葡萄糖溶液滴定斐林试剂，使葡
萄糖将斐林试剂中的Cu2+还原，当Cu2+完全被还原后，稍过量的葡萄糖溶液就会进一步将指示剂亚甲基蓝还原，使溶液由蓝色变为无色，从而使葡萄糖溶液体积耗用数转化为还原糖当量。
3.2.1.2试剂：还原糖甲液；还原糖乙液（14g/l）；0.1%糖液。
3.2.1.3仪器：10ml全自动滴定管；5ml大肚吸管；1ml直管；250ml三角瓶；
1000ml试剂瓶； 50ml容量瓶；洗耳球；玻璃珠。
3.2.1.4操作：
①用1ml直管准确吸取1ml二级种子液，移入50ml容量瓶中，加蒸馏水稀释至刻度，摇匀，备用。
②用5ml大肚吸管准确吸取斐林氏甲、乙液各5ml于250ml三角瓶内（加入3-4粒玻璃珠），摇匀，再用大肚吸管加入5ml稀释好的样液，混匀放在电炉上，加入一定量标准葡萄糖液（最好距离滴定点0.3ml），待沸腾后，以4～5秒/滴的速度滴至至溶液蓝色消失（无色）为终点。
③记录所用标准葡萄糖液体积。反复测定2~3次，以同样值为最终测定结果。
④空白测定：测定时不加样品，测定过程不变，与以上相同。
3.2.1.5计算：g/dl=[(V1-V2)×0.1/V3]×稀释倍数 其中：V1: 空白滴定时耗标准葡萄糖液的体积（ml）
V2: 样品滴定时耗标准葡萄糖液的体积（ml） V3: 取样体积（ml） 0.1：为标准葡萄糖浓度 3.2.1.6允许误差：0.05-0.1
3.2.2 OD检测方法
3.2.2.1测定原理：比色法是化学分析方法的一种，其原理是于被测定物质溶液的颜色或加入显色剂后所生成的有色溶液，其颜色强度和物质含量成比例。溶液中的物质在光的照射激发下，产生对光吸收的效应。因此，根据光被有色溶液吸收的强度，即可测出溶液内物质
含量的多少。
3.2.2.2仪器：722E分光光度计 3.2.2.3操作：
①将二级种子液吸取1毫升稀释20倍，在722E吸光度620nm处测定
②记录仪器所显示的数据，反复测定2~3次，以同样值为最终测定结果。
3.2.2.4允许误差：0.01-0.02
3.3.1PH值检测方法 3.3.1.1测定原理：将指示电极与参比电极浸入被测溶液构成原电极，在一定温度下，原电极的电动势与溶液的PH值呈直线关系，通过测量原电极的电动势即可测得溶液的PH值。
3.3.1.2仪器：PH计(酸度计)精确至0.02PH
3.3.1.3操作：测试前用磷酸盐标准缓冲液（PH=4.003与PH=6.86）在25摄氏度校正PH计，取50ml溶液作为式样液，用试样液冲洗电极3-4遍后，将电极插入试液中，测得试液的PH值。 3.3.1.4允许误差：同一样品的两次测定，绝对值之差不能超过0.05PH。
4.1发酵液检测规则
4.1.1取样
4.1.1.1 取样点：发酵罐
4.1.1.2 取样方法：先打开风阀进行吹风，约1分钟左右关闭，打开取样考
克进行取样。
4.1.1.3 取样量： 25ml左右 4.1.2检测频次：25次/每班。 4.2检验方法
4.2.1 糖含量检测方法
4.2.1.1测定原理：以甲、乙液为基础，用葡萄糖溶液滴定斐林试剂，使葡
萄糖将斐林试剂中的Cu2+还原，当Cu2+完全被还原后，稍过量的葡萄糖溶液就会进一步将指示剂亚甲基蓝还原，使溶液由蓝色变为无色，从而使葡萄糖溶液体积耗用数转化为还原糖当量。
4.2.1.2试剂：还原糖甲液；还原糖乙液（14g/l）；0.1%糖液。
4.2.1.3仪器：10ml全自动滴定管；5ml大肚吸管；1ml直管；250ml三角瓶；
1000ml试剂瓶； 50ml容量瓶；洗耳球；玻璃珠。
4.2.1.4操作：
①用1ml直管准确吸取1ml发酵液，移入50ml容量瓶中，加蒸馏水稀释至刻度，摇匀，备用。
②用5ml大肚吸管准确吸取斐林氏甲、乙液各5ml于250ml三角瓶
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