山西省长治市第二中学校2017-2018学年高二生物下学期期末考试试卷(含解析)

②对照实验中无关变量应保持适宜且相同，两组实验应置于相同且适宜的条件下发酵。 ③定期（或定时）取样，可判断发酵时间对发酵效果的影响。

（1）研究菌种和发酵时间对豆豉发酵效果的影响，实验的自变量为菌种和发酵时间的不同。 （2）发酵容器内上层大豆接触氧气较多，若上层大豆的发酵效果比底层的好，说明氧气促进发酵过程，该发酵菌是好氧菌。

（3）在实验后发现48 h内发酵效果随发酵时间呈直线上升关系，若要确定最佳发酵时间，需要延长发酵时间，直到发酵效果出现下降，最好的发酵效果所对应的时间即为最佳发酵时间。

（4）发酵过程中，微生物分解大豆储藏的有机物，为自身的生长、繁殖提供有机物合成的原料和能量，该过程中有机物的种类会增加，有机物的质量减少。

28.乙醇等\绿色能源\的开发备受世界关注。利用玉米秸秆生产燃料酒精的大致流程为：

（1）玉米秸秆预处理后，因该选用____酶和____酶形成纤维二糖，再使用___________酶使之转化为发酵所需的葡萄糖。

（2）从以下哪些微生物中可以提取上述酶？________（多选）

A．酿制果醋的醋酸菌B．生长在腐木上的霉菌C．制作酸奶的乳酸菌D．反刍动物瘤胃中生存的某些微生物

（3）若从土壤中分离产生这种酶的微生物，所需要的培养基为______（按功能分），培养基中的碳源为__________。微生物在纯化培养时常用方法是________和_________。 （4）在生产糖液的过程中，为了使酶能够反复利用，可采用___________技术。

（5）为测定培养液中某细菌数量，某小组同学抽取1mL培养液经10倍的梯度稀释后进行接种培养，每个培养基上接种量为0.1mL，随后对每个培养基中出现的菌落进行计数（结果如下）。培养液中菌体数目约为__________________个/mL 稀释次数 培养基编号 菌落数目

4 1 263 2 321 3 345 5 1 38 2 4 3 40 6 1 6 2 2 3 8 - 17 -

【答案】 (1). C1 (2). CX (3). 葡萄糖苷酶 (4). B D (5). 选择培养基 (6). 纤维素 (7). 平板划线法 (8). 稀释涂布平板法 (9). 固定化酶（固定化细胞） (10). 3.9×10 【解析】 【分析】

1、用植物秸秆生产酒精是利用微生物进行发酵的过程。植物秸秆中的有机物主要是纤维素，纤维素分解菌产生的纤维素酶能将其水解成葡萄糖。从土壤中分离纤维素分解菌的一般步骤是：土壤取样、选择培养、梯度稀释、涂布培养和筛选菌株。筛选纤维素分解菌必须使用以纤维素为唯一碳源的选择培养基，并且需要做产纤维素酶发酵葡萄糖的实验进行酶活性的检测。2、常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法，平板划线分离法的过程是：由接种环以菌操作沾取少许待分离的材料，在无菌平板表面进行平行划线、扇形划线或其他形式的连续划线，微生物细胞数量将随着划线次数的增加而减少，并逐步分散开来，如果划线适宜的话，微生物能一一分散，经培养后，可在平板表面得到单菌落。

【详解】（1）玉米秸秆预处理后，因该选用C1酶和CX酶形成纤维二糖，再使用葡萄糖苷酶使之转化为发酵所需的葡萄糖。

（2）由于纤维素分解酶存在于分解纤维素的微生物中，故应从富含纤维素的环境中去寻找纤维素分解菌，则应从生长在腐木上的霉菌和反刍动物瘤胃中生存的某些微生物中提取。故选：BD。

（3）若从土壤中分离产生这种酶的微生物，所需要的培养基按功能分为选择培养基，培养基中的碳源为纤维素。微生物在纯化培养时常用方法是平板划线法和稀释涂布平板法。 （4）在生产糖液的过程中，为了使酶能够反复利用，可采用固定化酶（固定化细胞）技术。 （5）统计菌落数目时，应该统计平板中菌落数目在30—300的，而第4次稀释后统计到的数目只有一个平板小于大于30小于300，第6次稀释后各平板统计的数目均小于30，这两次稀释后统计的数目误差较大，统计时应除去这两组数据。第5次稀释后统计的菌落数目有一个平板小于30，因此第5次稀释后两个平板上菌落的平均值为（38+40）/2=39个，因此培养液中菌体数目约为39/0.1×10=3.9×10个。

【点睛】本题以\绿色能源\为背景，考查分解纤维素的微生物和果酒发酵及微生物的培养与分离的相关知识，意在考查考生的识记能力和应用能力。微生物的应用的题目是一类综合性较强的题目，涉及的知识点比较多，包括微生物的培养和无菌技术操作，在复习的过程中注意总结、归纳，形成知识的网络结构。

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29.红细胞含有大量血红蛋白，红细胞的机能主要是由血红蛋白完成，血红蛋白的主要功能是携带O2和CO2，我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验，来提取和分离血红蛋白。请回答下列有关问题：

（1）实验前取新鲜的血液，要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠，加入柠檬酸钠的目的是_____________ 。洗涤红细胞时要用______（填溶液）反复洗涤、离心。要让红细胞破裂，释放血红蛋白时要加入_________。

（2）得到的血红蛋白溶液装入透析袋中透析，即血红蛋白的粗分离，目的是除去_______。 （3）然后通过_____（填方法）将样品进一步纯化，最后进行纯度鉴定，使用最多的是______（填方法）。

【答案】 (1). 防止血液凝固 (2). 生理盐水 (3). 蒸馏水和甲苯 (4). 去除样品中相对分子质量较小的杂质 (5). 凝胶色谱法 (6). SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 【解析】 【分析】

本题是对血红蛋白的提取和分离的实验的考查，回忆血红蛋白的提取和分离的实验的实验原理和操作步骤，然后结合题干信息进行解答。血红蛋白的提取与分离的实验步骤主要有：（1）样品处理：①红细胞的洗涤，②血红蛋白的释放，③分离血红蛋白。（2）粗分离：①分离血红蛋白溶液，②透析。（3）纯化：调节缓冲液面→加入蛋白质样品→调节缓冲液面→洗脱→收集分装蛋白质。（4）纯度鉴定--SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳。

【详解】（1）血红蛋白的提取和分离一般分为4步：样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定。采取血液时要在采血容器中预先加入柠檬酸钠以防止血液凝固。样品处理又包括红细胞洗涤、血红蛋白释放、分离血红蛋白溶液和透析4步。洗涤红细胞时要用生理盐水反复洗涤、离心。要让红细胞破裂，释放血红蛋白时要加入蒸馏水和甲苯。

（2）透析即是血红蛋白的粗分离，透析的目的是除去样品中分子量较小的杂质，透析的原理是透析袋能使小分子自由进出，而大分子则保留在袋内。

（3）样品的纯化是通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去。使用最多的是SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳。

【点睛】对血红蛋白的提取和分离的实验的实验原理和具体操作方法的掌握是本题考查的重点。

30.许多植物含有天然香料，如薄荷叶中含有薄荷油。现用薄荷叶提取薄荷油。回答问题： (1)薄荷油是挥发性物质，提取薄荷油时应选用____(选填“鲜”“干”)薄荷叶作原料，其原

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因是________________________________。

(2)用萃取法提取薄荷油时，采用的溶剂是______________，原理是_________________。 (3)用水蒸气蒸馏法提取薄荷油时，在油水混合物中加入氯化钠的作用是______________。常用于分离油层和水层的器皿是_________。分离出的油层中加入无水硫酸钠的作用是_____________________，除去固体硫酸钠的常用方法是_____。

【答案】 (1). 鲜 (2). 薄荷油易挥发，干燥过程中会使薄荷油挥发掉 (3). 酒精或石油醚、乙醚、戊烷等 (4). 薄荷油易溶于有机溶剂 (5). 增加盐的浓度，使分层更明显 (6). 分液漏斗 (7). 吸收油层中的水分 (8). 过滤 【解析】

试题分析：熟记并理解植物芳香油的提取方法、原理、实验流程等相关基础知识、形成清晰的知识网络。在此基础上结合题意作答。

(1) 由于薄荷油易挥发，鲜薄荷叶中薄荷油含量高，所以提取薄荷油时应选用鲜薄荷叶作原料。 (2) 由于薄荷油能溶于酒精等有机溶剂，所以用萃取剂提取薄荷油时可采用酒精作为有机溶剂。 (3) 用水蒸气蒸馏法提取薄荷油时，在油水混合物中加入氯化钠的作用是使溶液分层；常用于分离油层和水层的器皿是分液漏斗；分离出的油层中加入无水硫酸钠的作用是吸去油层中的水分；除去固体硫酸钠的常用方法是过滤。

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