鸡冠花黄酮化合物对DM小鼠脾脏及巨噬细胞吞噬功能的影

由饮水。实验第10周[3，5]，测小鼠体重，分离小鼠测脾重，并计算脾重指数。

1.3．2 单核巨噬细胞体外吞噬实验 实验10w,各组动物腹腔注射8%淀粉肉汤液体1ml致敏, 4d后，腹腔注射10ml Hanks液,10 min后抽取腹腔液 5ml,离心沉淀，取上清液用硫代巴比妥酸比色法检测MDA含量，取试管下部的腹腔细胞做单核巨噬细胞体外吞噬实验, 将腹腔细胞滴加在洁净的载玻片上， 用等量的1%鸡红细胞悬液滴加其上摇匀。置于玻璃平皿内盖好，并用胶带密封, 于37℃水浴30min, 其间轻摇玻璃皿2次，取出载玻片，生理盐水漂洗、固定、染色，观察60个巨噬细胞（N），计数已吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数（n）和所吞噬的鸡红细胞总数(m)。按下式计算吞噬百分率（a）： a = n/N × 100%， 及吞噬指数（k）: k=m/n。

1.4 统计学方法：用SPSS11.0软件进行统计学分析，组间进行t检验。

2 结果

2.1 小鼠体重、脾重、脾重指数 DM组体重低于Control组（P<0.05），但脾重指数显著高于Control组（P<0.01），CCF组与DM组相比体重增加（P<0.01），脾重指数显著降低(P<0.05)，CCF组与Control组比较各项指标无显著差异，单纯比较脾重各组间无显著差异，见表1。

表1 动物体重、脾重、脾重指数 (X?S)

Tab1 the body weight, spleen weight and index of spleen of the mice

Group 体重（g） 脾重(mg) 脾重指数

(mg/g)

Control35.44±2.07 a 202.67±21.25 6.742±0.735

b

组

5

DM组 32.67±1.87 CCF组 35.78±1.56 b

213.56±25.90 7.825±1.077 195.78±31.06 6.439±1.239

a

与DM比：a P<0.05 ; b P<0.01

2.2 单核巨噬细胞体外吞噬鸡红细胞的能力 DM组与control组比，小鼠单核巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬率显著增高

（P<0.01），吞噬指数也显著增加（P<0.05）， CCF组与DM组比单核巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬率及吞噬指数有所降低（P<0.01），而与正常对照组接近（P>0.05）,（表2）。

表2 单核巨噬细胞体外吞噬红细胞百分数与吞

噬指数

Tab 2 Phagocytotic function of Mononuclear macrophage of DM mice in vitro (X?S) Group 吞噬率(%) 吞噬指数 Control组 31.667+7.993b 1.588+0.420a DM组 39.074+3.829 2.129+0.354 CCF组 30.741+5.780b 1.729+0.364b 与 DM组比: a P<0.05 ; b P<0.01,

3 讨论

糖尿病是一种常见的内分泌功能障碍性疾病。常可产生许多并发症 ,在其并发症的形成中 ,巨噬细胞参与其多个环节。已有实验证实：在高糖环境下 ,巨噬细胞对CSF-1刺激增生反应能力增强 ,巨噬细胞与糖基化白蛋白一起培养可导致某些细胞因子的释放如TNF、IL-1 ,这些因子可导致细胞生理功能紊乱而产生许多并发症 ,特别是参与肾脏并发症的发生。动物在糖尿病状态下 ,巨噬细胞释放血管生长因子并刺激内皮细胞增生之能力增强 ,由此而导致糖尿病的微血管病变 (包括肾脏及视网膜病

6

变 )。糖尿病时巨噬细胞处于激活状态。巨噬细胞被激活后 ,其吞噬作用增强。在糖尿病大鼠,巨噬细胞通过产生NO抑制脾脏淋巴细胞对有丝分裂原的增殖反应 ,此可能与糖尿病人易发生感染有关[2]。陈国荣等人研究表明糖尿病大鼠腹腔及肺泡巨噬细胞对中性红的吞噬能力均大于对照组 ,进一步说明在糖尿病发病过程中巨噬细胞处于激活状态。此激活的巨噬细胞通过多种途径参与糖尿病并发症的形成[5]。

有研究表明一些植物黄酮类可促进糖尿病动物糖原恢复正常水平，增加细胞、组织和靶器官对糖的摄取，纠正糖代谢紊乱。桑叶富含黄酮类，将200 mg/kg桑叶提取物腹腔注射于STZ小鼠，可促进外周细胞利用葡萄糖。杨梅素可促进脂肪细胞对糖的摄取。由于炎症细胞浸润可导致胰腺β细胞损坏，给胰岛素依赖糖尿病大鼠模型用番叶木苷500mg，结果显示其抗炎、抗自由基及改善血管通透性的作用，与未给药组有明显差别。金雀异黄素、大豆苷元、大豆黄酮苷也显示出一定的抗炎作用。 目前，对黄酮类化合物抗糖尿病及其并发症药理作用研究大多在实验阶段，临床试验仅是少部分。黄酮类化合物药源开发，提取新的有效成分及药理药效，使临床应用范围扩张，国内外都十分重视。天然植物或药物中的黄酮类化合物毒性小，不仅可降低血糖，且可抑制并发症的发展。近年来植物黄酮类抗糖尿病及其并发症的研究状况表明, 植物黄酮类具有一定的抗氧化、抑制 α-糖苷酶、拟胰岛素作用、抗炎、抑制醛糖还原酶、抑制蛋白糖基化等作用[5]。

本研究中DM组体重低于正常对照组，但脾重、脾重指数增加，并且巨噬细胞的吞噬功能处于激活状态，显著高于正常对照组，与DM组相比CCF组脾重、脾重指数显著降低，单核巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬率及吞噬指数有所降低，与正常对照组接近。提示鸡冠花黄酮类化合物具有调节糖尿病动物巨噬细胞的吞噬作用，可能有利于减少巨噬细胞激活所引起的免疫病理损伤。其作用机理与鸡冠花中所含的抗氧化、调节机体免疫功能的类黄酮生物活性因子有关[1]有进一步研究的必要。

[1]. 翁德宝 ,汪海峰 ,翁佳颖 .普通鸡冠花序中黄酮类化合物的研究 [J].植物学通报 , 2000, 17(6):565-568.

7

[2]. KOBAYASHI S,L UO B,OKABE M,et al. The diabetic state

increase the activity but not the number of peritoneal macrophage in the GK rats promoting the tube formation of cultured endothelial cells in rat aorta[J]. Bio Pharm Bull,1996，19(2 ):199- 202

[3] 翁孝钢. 梁荩忠. 吴兆锋. 链脲佐菌素对实验性糖尿病大

鼠组织钙调素活性的研究. 新乡医学院学报 1995年12(3):201-204

[4]. 陈国荣,金丽琴,邵黎明, 实验性糖尿病大鼠巨噬细胞内酶

活性及吞噬功能的研究. 免疫学杂志.2000，16（5）：352-354 [5]. 俞灵莺, 李向荣. 植物黄酮类抗糖尿病及其并发症的研究

进展[J]. 国外医学卫生学分册.2000，27（6）331-335.

8