靶向MRP1基因pRNAT-H1.1以及shuttle-RFP重组质粒表达载体构建 - 毕业设计论文-精品 - 图文

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3.2 重组载体的菌落PCR

重组载体菌落 PCR电泳结果见图3-5，结果显示PCR扩增产物,电泳分析发现阳性产物可以扩增出560bp大小的条带，假阳性产物不能扩增出560bp大小的条带,与预期结果相符，可以初步筛选出阳性产物。

1 2 3 4 5 6 7 8 9

600bp

pppppp

500bp

图3-5 重组质粒菌落PCR电泳图

1、100bp marker；2-8、均为单菌落PCR产物,其中2,5为阳性产物 Fig.3-5 bacterial colony PCR screening pRNAT-H1.1/shuttle-RFP recombinant clone

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3.3 重组质粒大量提取

重组质粒大量提取后的电泳结果见图3-6，结果显示pRNAT-H1.1/shuttle-RFP 重组质粒大小约为6.2kb，与预期结果相符。

1 2 3 4 5 6

6000

图3-6 pRNAT-H1.1/shuttle-RFP 重组质粒大量提取电泳图 1、1kb DNA Marker； 2-3、H1.1； 4、H1.1-1；5-6、H1.1-2 Figure 3-6 recombined plasmid of pRNAT-H1.1/shuttle-RFP 1、1kb DNA Marker； 2-3、H1.1； 4、H1.1-1；5-6、H1.1-2

重组质粒大提并稀释50倍以后在紫外分光光度仪Genespec上测其OD值，结果见表3.3：

表3.3 重组质粒大提后OD值检测结果

Table 3.3 the OD value result of recombination vector

H1.1-1 H1.1-2

OD260 1.820 1.819 OD280 1.010 1.012 Ratio 1.820 1.793 Conc（μg/mL）

89.35 92.24 25

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3.4 重组质粒测序结果

pRNAT-H1.1/shuttle-RFP重组质粒测序鉴定结果见图3-7、3-8，结果显示重组质粒的碱基序列与预期结果一致，未发生碱基突变，说明pRNAT-H1.1/shuttle-RFP重组质粒构建成功。

重组质粒p1.1-1

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图3-7 重组质粒p1.1-1测序色谱图

Figure 3-7 Chomatography of the sequencing of recombined plasmid p1.1-1

重组质粒p1.1-2

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