第2章--核酸化学习题

答：（1）阳离子的存在可中和DNA中带负电荷的磷酸基团，减弱DNA链间的静电作用，促进DNA的复性；

（2）低于Tm的温度可以促进DNA复性；

（3）DNA链浓度增高可以加快互补链随机碰撞的速度、机会，从而促进DNA复性。 6．DNA分子二级结构有哪些特点？

答：按Watson-Crick模型，DNA的结构特点有：两条反相平行的多核苷酸链围绕同一中心轴互绕；碱基位于结构的内侧，而亲水的糖磷酸主链位于螺旋的外侧，通过磷酸二酯键相连，形成核酸的骨架；碱基平面与轴垂直，糖环平面则与轴平行。两条链皆为右手螺旋；双螺旋的直径为2nm，碱基堆积距离为0.34nm，两核酸之间的夹角是36°，每对螺旋由10对碱基组成；碱基按A=T，G≡C配对互补，彼此以氢键相连系。维持DNA结构稳定的力量主要是碱基堆积力；双螺旋结构表面有两条螺形凹沟，一大一小。

7．在稳定的DNA双螺旋中，哪两种力在维系分子立体结构方面起主要作用？

答：在稳定的DNA双螺旋中，碱基堆积力和碱基配对氢键在维系分子立体结构方面起主要作用。

8．简述tRNA二级结构的组成特点及其每一部分的功能。 答：tRNA的二级结构为三叶草结构。其结构特征为：

（1）tRNA的二级结构由四臂、四环组成。已配对的片断称为臂，未配对的片断称为环。 （2）叶柄是氨基酸臂。其上含有CCA-OH3’，此结构是接受氨基酸的位置。

（3）氨基酸臂对面是反密码子环。在它的中部含有三个相邻碱基组成的反密码子，可与mRNA上的密码子相互识别。

（4）左环是二氢尿嘧啶环（D环），它与氨基酰-tRNA合成酶的结合有关。 （5）右环是假尿嘧啶环（TψC环），它与核糖体的结合有关。

（6）在反密码子与假尿嘧啶环之间的是可变环，它的大小决定着tRNA分子大小。 9．如何快速判断核酸样品中是否有蛋白质污染？ 答：可用紫外吸收法。

通过紫外分光光度计测定样品在260nm和280nm处光吸收值，然后计算OD260/OD280的比值。如果DNA样品的OD260/OD280的比值大于1.8，RNA的OD260/OD280的比值大于2.0，一般被视为高纯度样品。如果低于这些数字，表明核酸溶液中含有蛋白质污染。

10．介绍两种常用于测定核酸样品含量的方法，并说明其原理？ 答：

（1）紫外吸收法：核酸在260nm有紫外吸收峰。在260nm测定光吸收值，如果是双螺旋DNA样品，OD260=1，则相当于含有50ug/mLDNA；若是RNA样品或单链DNA，OD260=1则相当于40ug/mL，从而可以计算获得核酸样品的含量。

（2）定磷法：核酸中P的含量比较稳定，可以通过定磷试剂测定样品中磷的含量，进而计算样品中核酸的含量。

（3）定糖法：核酸中核糖可以与地衣酚生成绿色化合物，而脱氧核糖与二苯胺反应生成蓝

色化合物，化合物颜色的深浅与糖含量成正比，可通过分光光度法测定核酸的含量。

（4）琼脂糖凝胶电泳：利用一个已知含量的DNA样品作为标准，在同一个凝胶上进行电泳，溴化乙锭染色后，根据电泳条带判断核酸样品的含量。