血凝基本知识

血凝的基本知识

一、定义：血液凝固（凝血）

形态：血液由液体状态转变为凝胶状态。

本质：纤维蛋白原（可溶）变为纤维蛋白（不溶）。

基本学说：凝血瀑布学说（血液凝固是一系列凝血因子酶反应过程；每个凝血因

子都被其前一因子所激活；最后激活凝血酶原生成凝血酶；凝血酶使纤维蛋白原转变为纤维蛋白，生成纤维蛋白凝块。

二、凝血功能的常规检测手段（检测凝血功能是否正常）：

1、Prothrombin time（PT）-凝血酶原时间测定（外源性凝血途径检测）。

2、Activated Partial Thromboplastin Time（APTT）-活化部分凝血活酶时间测定（内源

性凝血途径检测）。

3、Thrombin Time（TT）-凝血酶时间测定（共凝血途径检测）

4、特殊物质检测（检测引起凝血功能异常的原因）：Fibinogen（FIB）-纤维蛋白原测

定。

以上即为血凝常规四项检测。PT、APTT、TT为定性检验，FIB为定量检测。 三、凝血酶原时间测定（PT）

1、 原理：PT试剂中主要含组织因子（TF）和Ca2+，试剂中加入血浆后，TF和Ca2+与

血浆中Ⅶ因子，形成TF-Ⅶa- Ca2+复合物，启动外源性凝血途径。最后使凝血酶原形成凝血酶，凝血酶可使血浆中的纤维蛋白原转变为纤维蛋白。纤维蛋白的交联、聚合成凝胶状态。记录凝固时间，即为PT检测结果，一般以S表示。 2、 PT检测的临床应用

1）PT检测用于筛选评估外源性凝血途径各因子是否正常。 2）监控口服抗凝药病人的凝血功能：

口服抗凝药治疗时间比较长，治疗过程血药监控； 剂量增加或减少，回引起出血或凝血；

口服抗凝药治疗病人的治疗剂量、治疗时间由PT检测决定，一般要控制在

INR2.0~3.0之间。

INR（International Normalized Ratio）国际标准化比值

待测测血浆PT值（秒）INR=（正常人血浆常人血浆P数） 3、PT的ISI值：

）ISI

ISI International Sensitivity Index——国际敏感指数

ISI值是生产厂商生产的PT试剂与国际标准PT试剂测值相比的值，凡是出厂的PT

试剂必须标明其正确的ISI值。

如果ISI=1，则表示该试剂敏感度与国际标准试剂测值一致；ISI值越大，则表明该

试剂越不敏感。

目前国内冻干PT试剂的ISI值标识基本都不精确，而且偏高，大部分厂家的ISI

值大于1.3 。如果ISI＞1.6，则说明该PT试剂敏感性太低，不建议使用。

4、选择PT试剂的要点： 1）ISI值：ISI≤1.2 最好 ISI≤1.4 一般 ISI＞1.6 不建议使用

2）试剂成分来源：重组组织因子（基因工程方法）最好（我公司和DADE，长岛） 人胚胎组织（DADE）

新鲜兔脑粉（库尔特（贝克曼）、STAGO、太阳） 陈旧兔脑粉（大多数国产PT冻干试剂） 3）开瓶后稳定性

我公司PT试剂：开瓶后37℃稳定10天以上 同行冻干试剂：开瓶后37℃稳定8小时

建议：随着技术的发展，目前已经解决了PT试剂的稳定性问题，所以用户可以放心

的使用PT液体试剂，而且，PT液体试剂具有冻干试剂无可比拟的优点：

第一：稳定性好，用户不必担心一瓶试剂万一当天不能用完，开瓶后2-8℃一

个月内可放心使用。

第二：批间差差异微小：彻底解决了冻干试剂由于受原料限制而导致的批间差

大的问题。

第三：全液体试剂，均一稳定，无需复溶。 四、活化部分凝血活酶时间测定试剂（APTT） 1、原理：

1）主要成分：鞣花酸或白陶土、磷脂、钙离子。

2）鞣花酸或白陶土均为带负电荷异物，能激活待测血浆中Ⅻ因子，启动内源性凝血

途径。

3）磷脂代替血小板磷脂（待测血浆为贫血小板血浆）。

4）加入氯化钙，根据瀑布学说原理：Ⅸ、Ⅺ、Ⅷ因子等参与了反应，最后形成

FlXa—Ⅷa—Ca磷脂复合物；此复合物又能激活因子X，形成凝血活酶。

5）凝血活酶又使凝血酶原转变为凝血酶。 6）凝血酶使纤维蛋白原变成纤维蛋白而凝固。

7）加入氯化钙后，记录血浆从流动状态到凝固状态所需的时间即为活化部分凝血活

酶时间。

2、临床应用：

1）临床上对静脉注射肝素抗凝治疗的病人必须进行APTT检测，以便监控。 2）APTT的值应控制在1.5-2.5×基础秒数 基础秒数-肝素治疗前的APTT秒数。

不同的试剂，对肝素敏感度不同，白陶土试剂对肝素敏感，鞣花酸试剂使用方便，

所以大多数用户选用鞣花酸试剂。

3、国内APTT试剂（白陶土）现状：

目前，只有贝克曼库尔特、上海长岛、我公司提供液体白陶土试剂。 我公司APTT试剂稳定性好，开瓶后37℃稳定20天以上。 五、凝血酶时间测定试剂（TT）

1、原理：凝血酶使纤维蛋白原变成纤维蛋白而凝固。

TT的测定不同于PT、APTT，血浆本身的凝血因子除了纤维蛋白原外，均未参加反应。 2、临床应用：

1）鉴定是否有抗凝物质如肝素、抗凝血酶Ⅲ等的存在。 2）鉴定纤维蛋白原的质、量是否异常。

注意：TT没有国际标准，生产厂家根据自己的试剂给出一个正常范围。检测时，

试剂与血浆的比例，不同厂家会有所不同，正常范围也不同，应以说明书为准。

3、我公司TT试剂稳定性好，开瓶后37℃稳定12天以上。 六、纤维蛋白原测定试剂（FIB）：

2+

1、原理：

过量凝血酶加入待测血浆，凝固时间与纤维蛋白原含量成反比（双对数） 2、测定方法：

1）直接法：取已知靶值纤维蛋白原参比血浆，用缓冲液稀释成不同浓度，测定各浓

度凝固时间，然后在双对数图上做图，横坐标为浓度，纵坐标为时间，应为直线。 我公司可提供我公司FIB测定试剂的标准曲线（根据用户需求，有些用户不愿意自己做标准曲线）。

样本测定：1/10稀释血浆（1份血浆+9份缓冲液）测得凝固时间，在曲线上从纵坐标找到凝固时间，从此点画一平行于横坐标的直线与曲线相交，此交点垂直于横坐标的交点，即为该样本的FIB浓度。

全自动、半自动血凝仪输入标准曲线后可自动给出所测样本的FIB浓度。

2）衍算法：也称间接法，即在测定PT时，用PT的值计算出FIB含量。单该法不

准确，逐渐会被淘汰。

3、我公司标准曲线相关性r≥0.995. 开瓶后37℃稳定12天以上。

FIB有国际标准：WHO标准品98/612；可追溯性。

七、同行厂家： 1、国内：

1）上海太阳：市场占有量最大，以干粉试剂为主，目前已经推出液体试剂，逐步淘

汰干粉试剂。

2）上海太阳：全液体试剂，试剂质量好，目前，只有长岛和我公司PT试剂为基因

工程重组原料。为美国太平洋中国总代理（天津美德太平洋的进口试剂即从长岛处获得）。

3）保定天岳：全液体试剂，质量一般，PT试剂为兔脑粉液体试剂，不稳定。无APTT

白陶土试剂。

4）厦门信道：全液体试剂，试剂质量中等，PT试剂为兔脑粉液体试剂。 5）武汉中太：冻干试剂，质量中等。 6）西安交大开元：冻干试剂，质量中等。