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选择 wash solvent 为20s, purge solvent 为5 单击 Start 开始灌注.
3. 设定流速,平衡液相
在Masslynx主界面,单击Inlet Method 图标,
打开液相方法编辑窗口
单击status >单击ACQUITY Additional Status ,进入质谱交互控制台
注意:如在上述界面出现红灯,表示有错误产生。将光标移到红灯,会出现关于该故障的详细描述。下拉Tools菜单,按Reset Communication, 一般问题即可解决,全部显示为绿灯。
单击A 或B或 设定流速的位置,出现流速、比例设定对话框
设定液相流速与比例,单击对勾,如果后面要做调谐,可设定流速0.2-0.5ml/min(与液相方法流速一致),有机相与水相的比例为50:50
(注:此时如果质谱氮气未打开,可先将质谱阀流路切到废液,再开液相流速。)
四.准备质谱
1. 计算化合物单同位素质量数
在进行实验前,如有必要,可先根据化合物的分子式计算出分子量。在质谱实验中,一般需要用到的分子量为单同位素分子量,但试剂说明书等许多地方给出的是平均分子量,请注意差别。
Masslynx主界面> 单击Tools> Molecular Weight Calculator
输入化合物的分子式(大写-注意Cl、Br等正确的输入方法) 注意选单同位素Monoiso
Ion Mode:离子化模式,+ve 正离子,-ve 负离子
单击Calculate,带不同电荷的离子的质荷比出现在左下窗口。
2. 用Intellistart 开始调谐
a. 在Masslynx 主界面单击MS Tune图标,打开调谐窗口
b. 单击 API Gas 图标 打开氮气,
c. Ion Mode> Electraspray+(ES+) 或 Electrospray-(ES-)
c. 单击 打开高压
d. 设定液相流速如:0.2ml/min, A1: B1(水:乙腈)比例为50:50 e.选择MS Mode 图标
f. 把调谐液放入A(或B)号位(注: 调谐液需要较高浓度,视化合物响应,起始浓度可在50-300ppb左右,响
应值在e6-e8之间左右较好,浓度过高会导致系统严重污染)
g. 选择Fluidics,单击Purge 图标
,purge A 瓶中的调谐液
?Start infusing ?开始进样 ?Purge syringe ?灌注注射器
?Refill the syringe ?重新灌满注射器
Purge 结束,选择Valve Position 为 Combined 模式
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