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选修1 NO.12 第一章 第二节植物组织培养技术(2)
编制:杨景 审核 周次_________ 班 组 姓名 组内评价 教师评价 【学习目标】1了解植物组织培养技术的一般流程 2 了解植物组织培养的培养基的配制和用途
【寄语】人的一生也像四季:春播、夏长、秋收、冬尝。朋友,趁 你青春风发,努力撒播
幸福 的种吧!
一、实验过程
1.试剂和器具的准备 2. 配制培养基
①.MS基本培养基按物理性质划分应是____________________________ ②.MS基本培养基中的糖类物质是________________________________ ③.愈伤组织形成的培养基中两种植物激素的比例是_______________________________ ④.分化芽的培养基中两种植物激素的比例是_____________________________________ ⑤.分化根的培养基中两种植物激素的比例是_____________________________________ 3. 培养基的灭菌
①.灭菌的方法是_____________________________________ ②.检查灭菌是否彻底的方法是_________________________ 4. 取材和接种
①取材:组织培养所用的材料非常广泛,可采取根、茎、叶、花、芽和种子的子叶,
时也利用花粉粒和花药,其中根尖不易灭菌,一般很少采用。对于木本花卉来说,阔叶树可在一、二年生的枝条上采集,针叶树种多采种子内的子叶或胚轴,草本植物多采集茎尖。在快速繁殖中,最常用的培养材料是茎尖,通常切块在0.5厘米左右,如果为培养无病毒苗(脱毒苗)而采用的培养材料通常仅取茎尖的分生组织部分,其长度在0.1毫米以下。
问题一:制备脱毒苗时为什么要去茎尖的分生组织部分呢?
②材料的处理:
(一)先将材料用流水冲洗干净,最后一遍用蒸馏水冲洗,再用无菌纱布或吸水纸将材
料上的水分吸干,并用消毒刀片切成小块。
(二)在无菌坏境中将材料放入70%洒精中浸泡30-60秒。
(三)再将材料移入_________________或__________________中消毒5-15分钟。 (四)取出后用无菌水冲洗三、四次。
③制备外植体: 将已消毒的材料,用无菌刀、剪、镊等,在无菌的环境下,剥去芽的鳞
片、嫩枝的外皮和种皮胚乳等,叶片则不需剥皮。然后切成0.2-0.5厘米厚的小片,这就是外植体。在操作中严禁用手触动材料。
④接种:在无菌坏境下,将切好的外植体立即接在培养基上,每瓶接种4-10个。 5.观察与记录外植体的生长情况
6. 转接培养,将增长到一定体积的愈伤组织先后转接到分化芽和分化跟的培养基上。 7. 露地栽培(试管苗的炼苗和移栽): 试管苗从无菌到光、温、湿稳定的环境进入自然环
境,必须进行炼苗。一般移植前,先将培养容器打开,于室内自然光照下放3天,然后取出小苗,用自来水把根系上的营养基冲洗干净,再栽入已准备好的基质中,基质使用
前最好消毒。移栽前要适当遮荫,加强水分管理,保持较高的空气湿度(相对湿度 98%左右),但基质不宜过湿,以防烂苗
问题二:试管苗在移栽之前为什么要先进行炼苗处理?
问题三:试管苗在移出时,根上的培养基为什么要洗净?
【当堂检测】
1.生物体内细胞没有表现出全能性,原因是( ) A.细胞丧失了全能性 B.基因的表达有选择性 C.基因发生了变化 D.不同细胞基因不同 2.人工种子的培育中应用的主要技术是( ) A.有性杂交 B.植物体细胞杂交 C.植物组织培养 D.细胞全能性 3.植物组织培养过程中的脱分化是指( )
A.植物体的分生组织通过细胞分裂产生新细胞 B.未成熟的种子经过处理培育出幼苗的过程
C.植物的器官、组织或细胞,通过离体培养产生愈伤组织的过程 D.取植物的枝芽培育成一株新植物的过程 4.对人工种子正确的解释是( )
A.通过科学手段人工合成的种子 B.利用植物组织培养技术获得的种子 C.种皮能够自我生成的种子 D.人工种子发芽率低
5.植物组织培养常用的一种培养基为MS培养基,下列叙述正确的是( ) A.MS培养基为固体培养基 B.MS培养基不含碳源 C.MS培养基中所有成分均需高压蒸汽灭菌 D.MS培养基pH为7.O 6.下列细胞的全能性最高的是( )
A.植物的卵细胞 B.被子植物的受精卵 C.植物的精子 D.被子植物的叶肉细胞 7.愈伤组织的细胞最突出的特性是( )
A.细胞大,排列整齐,分裂能力强 B.细胞高度液泡化,处于无定形状态 C.代谢活跃,形状呈正方形 D.分裂能力强,易形成根和芽 8.生物体之所以具有不同的组织器官是由于( )
A.基因选择性表达的结果 B.部分基因功能丧失的结果 C.分成含不同基因细胞的结果 D.外界环境影响的结果
9.植物组织培养的培养基中加有激素,下表是培养基中两种植物激素在不同比例时的实验结果,请分析回答:
实验 组别 激素种 类及浓 度关系 结果
l 6-BA 组织块 产生愈 伤组织 2 6-BA >IBA 愈伤组 织分化 出芽 3 6-BA >IBA 愈伤组 织不断 生长 4 6-BA (2)IBA是_______________类激素,它在本实验中的作用是________________。 (3)在植物组织培养中,脱分化可用的激素组合是实验________________和实验 ________________中的浓度关系,再分化可用的激素组合是实验________________和实验中的激素浓度关系。 (4)判断愈伤组织是否产生,依据是看是否产生了________________ 细胞。
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