生物工程概论期末考试题

2.重组 DNA技术的基本过程包括：( ACDE ) A．目的基因的获取 C．克隆载体的构建

D．目的基因与载体的连接 E．重组体分子导入受体菌 3.基因克隆又称为：( AC )

A．重组 DNA C．DNA克隆 4.组成PCR反应体系的物质包括：( BD )

B．Taq DNA聚合酶 D．DNA模板 5.对于重组体的筛选，属于直接选择法的是：( BCD )

B．原位杂交法 C．Southern印迹 D．补救标志筛选 6.对于重组体的筛选，属于非直接选择法的是：( AE )

A．免疫化学法 E．酶联免疫筛选 7.限制性核酸内切酶切割 DNA时可产生：( ABCE )

A．5’粘性末端 B．3’粘性末端 C．平末端 E．粘性末端 8.基因工程中目的基因的来源有：( ABCDE )

A．化学合成 B．PCR合成 C．cDNA文库 D．基因组文库 E．组织细胞中染色体DNA直接提取 9.基因工程中外源性基因又称为：( ABD )

A．目的基因 B．目的 DNA D．target DNA 10．重组DNA技术中常用的工具酶有：( ABCDE )

A．限制性核酸内切酶 B．DNA聚合酶Ⅰ C．DNA连接酶 D．反转录酶 E．末端转移酶 11．作为基因工程的载体必须具备的条件是：( ABCD )

A．能独立自主复制 B．易转化 C．易检测（含有抗药性基因等） D．具有限制性内切核酸酶的位点 五、填空题

1．基因工程的一个理想的载体必须具备的条件有__至少有一个复制起点__、__有克隆位点、具备转化的功能、遗传标记基因__、__具有较高的装载能力__。

2．基因工程常用的载体DNA分子有______、______和______。 3．一个完整的DNA克隆过程应包括______的获取、______的选择与构建、 ______与载体的拼接、重组体导入______、筛选与鉴定出______。

4．目的基因获取的途径或来源有______、______、______、______。 5．基因工程过程中重组体直接筛选法的方式有______、______、______。 6．当细胞与细胞或细菌通过菌毛相互接触时，______就可以从一个细胞（细 菌）转移到另一细胞（细菌），这种类型的DNA转移称为______作用。 7．重组DNA技术中常用的工具酶有______、______、______、______。 8.Klenow没的活性有：5’ 3’聚合酶活性；3’ 5’外切酶活性

9. 人工化学合成DNA新形成的核苷酸的合成方向是’ 3’ 5’，合成的DNA5’末端是-OH; 3’ 末端是-OH

10.进行PCR扩增DNA时，反应体系应加入模板DNA，Taq酶、一对引物、d NTP和缓冲液。 5.现代生物工程主要包括 基因工程， 酶工程， 细胞 工程， 发酵 工程。 6．使DNA的结构分析问题从根本上得到了解决的两项关键性工程技术分别是DNA分子的体外切割与连接技术和DNA分子的核酸序列分析技术。

7．基因工程的工具酶主要有限制性核酸内切酶和DNA连接酶。 8．基因克隆载体主要有质粒、噬菌体、病毒三大类。

9．基因克隆载体应具备的条件是有克隆位点（外源DNA插入点），能携带外源DNA进入受体细胞， 能自主复制；具有选择标记，便于重组体的筛选和鉴定；

10．将外源性重组DNA导入受体细胞的途径有 转化（或转染）、杂交、转导、细胞融合、显微注射等方式。

11．目的基因导入受体细胞成功的关键是：选用合适的克隆载体、选用合适的受体细胞、选用合适的基因转移方法。

12．基因克隆受体细胞有原核细胞和真核细胞。

13．克隆基因的进一步鉴定常采用限制性内切酶分析、分子杂交、PCR扩增、DNA侧序等方法。

18．限制性酶的发现标志着DNA重组时代的开始。（√ ）

19.1982年世界上第一个基因重组药物——人胰岛素在美国问世产生了巨大的社会效益和经济效益。（√ ）

20.根据基因操作的目的不同，可以将基因治疗分为基因置换治疗和基因增强治疗。（ √ ） 21.根据治疗对象不同可将基因治疗分为性细胞基因治疗和体细胞基因治疗。（ √ ）

22.1982年世界上第一个基因重组药物——人干扰素在美国问世产生了巨大的社会效益和经济效益。（× ）

23. 根据基因操作的目的不同，可以将基因治疗分为性细胞基因治疗和体细胞基因治疗。（× ）

24. 单克隆抗体技术是动物细胞工程技术。（ √ ）

25．用同一种限制酶切割含有目的基因的外源DNA和载体DNA，产生的DNA片段的粘性末端是相同的（ √ ）

26．用同一种限制酶切割含有目的基因的外源DNA和载体DNA，产生不同的DNA片段的粘性末端（× ）

27．基因工程、细胞工程、发酵工程和酶工程它们之间是相互关联和交叉渗透（ √ ） 六、名词解释

1.回文结构（ palindrome） 2.目的 DNA（target DNA）

3.α-互补（alpha complementatlon） 4.基因组 DNA文库（genomic DNA library） 5.cDNA文库（cDNA library） 6.DNA克隆（DNA cloning

七、简答题

1.什么叫基因克隆？简述基因克隆的步骤。 2.限制性内切核酸酶有哪些特点？ 3.简述重组DNA技术中获取目的基因的途径。

4.已知有一mRNA分子，你怎样才能使它翻译出相应的蛋白质？简述其过程。 5.作为基因工程的载体必须具备哪些条件？ 八、论述题 1.简述α互补筛选重组体质粒细菌的原理。 2.基因工程中重组体筛选的方法有哪些？

1．何谓基因工程？简述人类基因组计划在医药方面的意义和应用。

答：基因工程——在体外将不同生物的基因（DNA）和载体(质粒、噬菌体、病毒)DNA连接，构成遗传物质的新组合（重组DNA） ，然后转入微生物或细胞内(寄主细胞进行克隆)，使转入的基因在宿主细胞内表达产生所需要的蛋白质而能持续稳定地繁殖，并通过工程化为人类提供有用产品和服务的技术。

人类基因组计划在医药方面的意义有基因治疗、基因制药、基因芯片； 基因工程在医药科学中的应用： （1）发现疾病基因

（2）发展生物制药——蛋白质—肽类药物的生产 （3）基因诊断和基因治疗 （4）遗传病的预防

5．DNA结构分析靠哪两项关键技术？简述基因操作常用的工具酶及其作用。 答：使DNA的结构分析问题从根本上得到了解决的两项关键性工程技术是： （1）DNA分子的体外切割与连接技术； （2）DNA分子的核酸序列分析技术。

基因操作常用的工具酶有限制性内切酶和DNA连接酶；两者所起的作用是：

限制性核酸内切酶(简称限制酶)分别对载体DNA和目的基因进行切断，以便于重组。 DNA连接酶将目的基因（外源DNA）和载体DNA分子连接起来，形成重组DNA分子。 6、何谓基因克隆载体？基因克隆载体至少具备哪三个条件？常用有哪几类载体？ 答：基因克隆载体是能承载外源DNA片段（目的基因）并将其带入受体细胞的传递者。 基因克隆载体具备条件：

（1）有克隆位点（外源DNA插入点），常具有多个单一酶切位点（多克隆位点）； （2）能携带外源DNA进入受体细胞， 能自主复制；

（3）具有两个以上的遗传标记物，便于重组体的筛选和鉴定； （4）易从宿主细胞回收

常用的载体(vector)主要有三大类：质粒、噬菌体、病毒。

第二章《基因工程》复习题

一、选择题

1. 限制性核酸内切酶是由细菌产生的，其生理意义是 （D） D 提高自身的防御能力

2.生物工程的上游技术是（D） D 基因工程及蛋白质工程

3. 基因工程操作的三大基本元件是:(I 供体 II 受体 III 载体 IV 抗体 V 配体) （A） A. I + II + III