HZ27抑制786—O 细胞的迁移实验研究 - 图文

本 科 毕 业 论 文

题 目 HZ27抑制786—O 细胞的迁移实验研究 学 院

专 业 化学制药 班 级

学 号 学生姓名 指导教师 完成日期

摘要：目的 研究HZ27药物对于肾癌786—O细胞迁移的影响。 方法 本实验通过采用肾癌786—O细胞培养方法培养细胞，肾癌786—O细胞传代方法使细胞增殖，肾癌786—O细胞的Transwell的实验观察细胞的迁移变化以及肾癌786—O细胞的免疫印迹等方法检测细胞中Rac蛋白的变化情况。 结果 药物HZ27抑制Rac蛋白的表达，从而抑制肾癌786—O细胞的活性，使其细胞转移能力降低。 结论 通过研究不同剂量的HZ27药物对细胞中蛋白质Rac的表达进行抑制来达到肾癌细胞迁移能力抑制的结果，证明Rac蛋白可以抑制肾癌786—O细胞的迁移。

关键词：肾癌786—O细胞；细胞培养；细胞传代；Transwell实验；免疫印迹实验

Abstract: Objective to study the effect of HZ27 drug for renal cell carcinoma in 786-O cell

migration.Methods of this experiment through 786-O cell culture method of cell, renal cell carcinoma in 786-O method of cell passage cell proliferation,Kidney cancer 786-O Transwell experimental observations of cell migration changes and renal cell carcinoma in 786-O cells immune blotting detection Changes of Rac protein in cells.Results the expression of HZ27 drugs inhibit Rac expression, thereby inhibiting renal cell carcinoma in 786-O cells, reduce the cell transfer ability. Conclusion inhibition to achieve renal carcinoma cell migration inhibition results through the expression of HZ27 dose of the study drug on protein in Rac cells. Rac protein can inhibit themigration of proven renal cell carcinoma in 786-O cells.

Keywords: Kidney786—Ocell;Cell culture method;Cell extend the method;Transwell

migration experiment;Western blot

目录

1 前言 .................................................................... 1 2 实验部分 ................................................................ 3 2.1实验仪器及试剂 ........................................................ 3 2.2肾癌786—O细胞的培养实验 ............................................. 3 2.3肾癌786—O细胞的传代实验 ............................................ 4 2.4肾癌786—O细胞的Transwell迁移试验 .................................. 4 2.5免疫印迹法检测肾癌786—O细胞中蛋白Rac表达实验 ....................... 4 3 结果与讨论 .............................................................. 5 3.1 Rac转染786—O细胞 ................................................... 5 3.2 细胞活性 ............................................................ 5 3.3 Transwell迁移试验 ................................................... 5 3.3.1细胞迁移定性分析 .................................................... 5 3.3.2细胞迁移定量分析 .................................................... 6 3.4 免疫印迹试验 ......................................................... 8 4 结论 ................................................................... 8 参考文献 .................................................................. 9 谢辞 ..................................................................... 10

HZ27抑制786—O 细胞的迁移实验研究

医药化工学院 化学制药专业 学生： 指导教师：

1 前言

目前，我国有数据统计国家泌尿系统肿瘤患者中，肾细胞癌患者人数仅低于膀胱癌患者人数，居于第二位，可以见得我国肾癌患者的发病率是非常高的。而这些癌症患者中患恶性肿瘤的成人占到百分之二，小孩患恶性肿瘤概率高达百分之二十，这引起了社会广大人士的关注。肾癌的发病率非常高，所以早在一百年前就有人对肾癌发病率做了统计。美国的科学家 Katz 等[1]在他们的报告中记录了从1935年到1989 年的肾肿瘤发病人数。他们发现10万患有肾肿瘤的男性中肾癌发病人数从1.6万人次增长到9.6万人次, 10万患有肾肿瘤的女性中肾癌发病人数从0.7万人次升至4.2万人次，相比之下男性患病人数远远高于女性，这五十几年间肾癌发病率有着明显的增长趋势。而究其原因这也许和科学技术的不断进步脱不了关系，但增长数据如此之大也可以见得肾癌问题日益严峻。当然，由于各国各族各个地区的人们生活习性以及生活方式有所不同，肾癌的发病率也是各有千秋的。曾有数据显示，亚洲人的肾癌发病率比欧洲美洲非洲等地区低。近年来，我国对于肾癌患病人数做了以下统计：男性患病人数是女性的二倍；由于体检普及及医疗水平不断进步，无症状肾癌的比重大大提高。从肾癌的发病率我们可以得出以下结论：研究彻底治疗肾癌方法刻不容缓。肾癌最可怕之处便是它容易发生转移，这就决定了它死亡率的高低。有报告显示：类似于肾癌发病率，亚洲人的肾癌死亡率也比欧洲美洲非洲等地区低，这可能与遗传因素有关。由于肾癌患者在肾癌初期很少有发生临床症状，百分之九十的患者很难察觉到自己患了疾病。一般地，如果患者出现腰背酸痛，肚子胀痛以及尿血等症状时，那这个病人也就有可能已经是肾癌晚期[2]。我国2009年做过调查，在十万男性患者中死亡人次有2.37万，十万女性患者这死亡人次有1.41万[3]。此结果显示男性患者死亡率略高于女性患者，且肾癌死亡率较高。现如今，医疗设备不断提高，医疗手段不断进步，体检系统的不断完善，让我们喜而乐见的是肾癌死亡率正在不断下降。对待肾癌，我们应该做到早预防，早发现，早治疗。

肾癌导致死亡的最主要因素是其非常容易发生转移，而它转移的途径和部位影响了患者的存活。肾癌的第一种传播途径是通过直接浸润来传播：肾细胞癌在中晚期会不断变大，刺出肿瘤外膜向周围扩大，外向突破其包膜压迫到与肾相近的肝，脾以及肾上腺，结肠等器官和组织，内向则浸润到肾盂。第二种途径是通过淋巴途径来传播转移，其中约四分之一的肾癌是经过这条途径传播：肾癌逐渐长大，右侧扩张到肾门周围、主动脉下腔静脉前或间淋巴结，左侧触及到主动脉前及它左侧的淋巴结，部分也可到达主动脉前乃至转移到人体肺部。肾癌最重要的传播途径便是血液运输转移：

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