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4.5.2高效液相色谱法
刘朵花[37]等研究表明沙棘果中黄酮类化合物主要以这三种黄酮及甙形式存在,其中：异鼠李素(72%)、槲皮素(21%)和山奈酚(7%)，使用高效液相法测定沙棘黄酮一般是主要测定沙棘黄酮中的异鼠李素、槲皮素、山萘酚的含量。而测定方法分为样品水解后测定和未水解测定。未水解测定的主要是沙棘黄酮类化合物中的异鼠李素、槲皮素和山萘酚等黄酮苷元，而样品水解后，异鼠李素、槲皮素和山萘酚的甙水解成其相应的苷元。
（1）未水解测定：吴素林[38]应用高效液相色谱仪采用岛津CLC-ODS反相柱，以甲醇：水：磷酸(60:40:0.4,v/v/v)为流动相，检测波长370nm，采用外标法同时测定了沙棘果肉中异鼠李素、槲皮素及沙棘总黄酮的含量，据报道该方法重现性好，异鼠李素的平均回收率为94.9%，变异系数为1.4，槲皮素的平均回收率为95.6%，变异系数为1.6。
（2）水解法：张荣泉[39]比较分析了大量沙棘黄酮的水解和未水解样品的硅胶G薄层色谱和液相色谱图，发现水解后样品中几种苷元含量均明显增加。测定具体条件如下：水解条件：样品置250ml圆底烧瓶中,加甲醇20ml,25%盐酸5ml,水浴回流提取45分钟,趁热过滤,用甲醇稀释定容至50ml,精密吸取1ml,于5ml量瓶中,用甲醇稀释定容至刻度,摇匀,即得供试液。色谱条件：色谱柱:岛津Shim-packvp-ODS5μm250L(mm)*4.6(i,d);流动相:甲醇—0.4%磷酸(60∶50);流速1.0ml/min;检测波长370nm;柱温30℃;定量方法为外标法。
4.5.3电泳电化学检测
毛细管电泳（ＣＥ）作为一种分离方法以其高效、快速,进样量少及灵敏度高等优点得到了广泛的应用，已用于植物中芦丁等黄酮类物质的测定。彭友元[84]等成功地应用该法于中药沙棘黄酮口服液中芦丁和５-羟色胺的测定，并确定了最佳测定条件;以直径为300μｍ的碳圆盘电极为检测电极，电极电位为0.09Ｖ（vsＳＣＥ），在50mmol/L硼酸盐缓冲液（pH 8.5）中，上述２组分在12min内完全分离,被分析物的电流响应与浓度在约３个数量级范围内呈良好线性关系，检出限分别为3 x 10-7mol/L和8 x 10-8mol/L,７次测定含5.0 x10-4mol/L的芦丁和５-羟色胺的标准溶液，峰高的相对标准偏差分别为2.5%和3.8%。但这种方法尚在试验阶段，还没有大范围推广。
4.6黄酮类化合物研究的国内外现状与发展趋势
从上个世纪80年代以来，黄酮类化合物的开发己越来越受到学术界的关注，截到目前，我国对黄酮类化合物的研究主要集中在分离提取、结构鉴定方面，对结构修饰以及黄酮类化合物进行结构修饰和构效关系的研究较少。对黄酮进行结构修饰，可以根本上改变黄酮类化合物的理化性质，从而改变其生物学效价，获取符合现代人们需要的生物活性效果，同时也会促进黄酮资源的开发和利用。
5大果沙棘概况
大果沙棘属胡颓子科沙棘属植物，落叶灌木或小乔木，又名沙枣、酸柳果、酸柳、其察日嘎察(蒙名)、达普(藏名)、吉汉(维吾尔名)。
5.1大果沙棘研究概况
大果沙棘在我省的自然资源十分丰富，但目前对其的开发利用大多是用其果实进行原料开发，还没有对其进行有效成分和生理功能的研究。
周芳[40]对不同提取方法提取大果沙棘黄酮工艺进行分析：
5.1 超临界CO2预处理大果沙棘油的工艺研究
王振宇等[41]通过正交试验得出超临界预处理的最优组合:萃取压力35MPa，萃取温度45℃，提取时间1.5h，分离温度45℃，对最佳组合条件进行验证，验证结果为可脱除大果沙棘中11.2%的油脂。
5. 2水提法萃取大果沙棘黄酮最佳工艺参数确定
通过正交试验得出水提取法的最优组合:温度80℃，提取时间2.5h，料液比1:25。通过验证试验黄酮得率为4.80mg/g。
5.3索氏法萃取大果沙棘黄酮最佳工艺参数确定
通过正交试验得出索氏提取法的最优组合:乙醇浓度70%，提取时间2.5h，料液比1:20。通过验证试验黄酮得率为8.95mg/g。
5.4超声波法萃取大果沙棘黄酮最佳工艺参数确定
通过王振宇等[42]通过响应面分析法对超声波提取进行分析，得出最佳工艺为79.3%乙醇，超声功率928w，超声时间27.4min，料液比15.3:l，黄酮得率为10.01mg/g。而索氏提取法的黄酮得率为8.95mg/g，水提法的黄酮得率为4.SOmg/g。
故对于大果沙棘黄酮的提取，超声波法优于索氏提取法优于水提法。
5.6大果沙棘黄酮的纯化工艺研究
通过对吸附介质的吸附能力和解吸能力的对比，找到了适合纯化大果沙棘黄酮的吸附介质，聚酰胺60-100的吸附能力13.13mg/g，吸附能力为13.3%，可以达到吸附与解吸的平衡，并对两种聚酞胺树脂建立。同时研究了聚酞胺树脂对大果沙棘黄酮解析性能的研究，确定了最佳上样量为萃取液浓缩干品与聚酸胺量比值为0.2:7，洗脱流速为2.5mL/min为最佳，得到三种洗脱流份，颜色为浅黄色，深黄色，黄绿色。
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