2019-2020学年人教版生物选修三江苏专用练习：1.2 基因工程的基本操作程序 演练强化提升 Word版含解析

(3)基因工程中，某些噬菌体经改造后可以作为载体，其DNA复制所需的原料来自____________。

解析：(1)作为运载体的质粒上应有一个至多个限制酶切割位点，在细胞中能够自我复制，且含有特殊的标记基因。(2)未被转化的大肠杆菌和仅含环状目的基因的大肠杆菌中均未导入质粒载体，而质粒上含有氨苄青霉素抗性基因，因此这样的大肠杆菌在含有氨苄青霉素的培养基中不能生长。含有质粒载体和含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌中都含有氨苄青霉素抗性基因，二者在含有氨苄青霉素的培养基中都能生长，因此无法区分二者。根据题图，用BamH Ⅰ切割质粒后将四环素抗性基因破坏，因此可将经氨苄青霉素培养基筛选出的菌落置于含有四环素的培养基上再次筛选，能在含四环素培养基上生存的是含有质粒载体的大肠杆菌，不能生存的是含有插入目的基因的重组质粒的大肠杆菌。(3)噬菌体为病毒，经改造后作为载体时，其DNA复制所需原料来自受体细胞。

答案：(1)能自我复制、具有标记基因 (2)二者均不含有氨苄青霉素抗性基因，在该培养基上均不生长 含有质粒载体 含有插入了目的基因的重组质粒(或答含有重组质粒) 二者均含有氨苄青霉素抗性基因，在该培养基上均能生长 四环素 (3)受体细胞

12．(2019·湖北七市教科研协作体联考)人血清白蛋白(HSA)是血浆中含量最丰富的蛋白质，在维持血浆渗透压、抗凝血等方面起着重要作用，具有重要的医用价值。下图是用基因工程技术获取重组HSA(rHSA)的两条途径。

(1)为获取HSA基因，首先要提取人血细胞中的mRNA，利用____________法合成cDNA，再利用____________技术进行快速扩增，在这一过程中，需要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成____________。

(2)构建在水稻胚乳细胞内特异表达rHSA的载体时，需要选择水稻胚乳细胞启动子，而不能选择其他物种和组织细胞的启动子，原因可能是___________________________。

(3)在利用农杆菌转化水稻受体细胞的过程中，为了吸引农杆菌移向水稻受体细胞，需添加____________物质。

(4)选用大肠杆菌作为受体细胞的优点有____________(答出两点即可)。但相比于水稻胚乳细胞，利用大肠杆菌获得的rHSA也有一些缺点，请从生物膜系统的角度进行分析________________________________________________________________________。

(5)利用上述方法获得的rHSA不能直接用于临床医疗，你推测的原因是________________________________________________________________________。

答案：(1)反转录 PCR 引物 (2)启动子具有(物种及组织)特异性 (3)酚类

(4)繁殖快；单细胞；遗传物质少(答出两点即可) 大肠杆菌没有生物膜系统(或内质网和高尔基体)，不能对rHSA进行深加工

(5)rHSA可能没有生物活性或功能性较差或rHSA可能有安全隐患(答案合理即可) 13．(2019·新疆四中高二期末)下图是从酵母菌中获取某植物需要的控制某种酶合成的基因的流程，结合所学知识及相关信息回答下列问题：

(1)图中cDNA文库________(填“大于”“小于”或“等于”)基因组文库。 (2)①过程提取的DNA需要________________的切割，B过程是________________。 (3)为在短时间内大量获得目的基因，可用__________________扩增的方法，其原理是________________________________________________________________________。

(4)目的基因获取之后，需要进行________________。

(5)将该目的基因导入某双子叶植物细胞，常采用的方法是__________________，其能否在此植物体内稳定遗传的关键是________________，可以用__________________技术进行检测。

答案：(1)小于 (2)限制酶 逆转录 (3)PCR技术 DNA复制 (4)基因表达载体的构建 (5)农杆菌转化法 目的基因是否整合到植物细胞的染色体上 DNA分子杂交

14．(2019·广东中山高二期末)下图甲表示我国自主研发的转基因抗虫水稻“华恢1号”的主要培育流程，请据图回答下列问题：

甲

乙

(1)杀虫基因通过①～④，最终在宿主细胞内维持稳定和表达的过程叫做________；其中____(填标号)是转基因抗虫水稻的核心步骤，需要的工具酶是________________________、____________。

(2)“华恢1号”的培育过程应用的主要生物技术有________________________、________________。

(3)构建重组质粒时，常用Ti质粒作为载体，是因为Ti质粒上具有T-DNA，它能把目的基因整合到受体细胞(植株细胞)的________________上。

(4)图乙是天然土壤农杆菌Ti质粒结构示意图(部分基因及部分限制酶作用位点)，组建理想的载体需要对天然的质粒进行改造，据图分析：

①人工改造质粒时，要使抗虫基因表达，还应插入________，其作用是____________________________________________。

②人工改造质粒时，先用限制酶Ⅰ处理，可以去除质粒上的________基因和________基因(填上图质粒上的基因名称)，保证重组质粒进入水稻细胞后不会促进细胞的分裂和生长；然后再用限制酶Ⅱ分别切割经过改造的

理想质粒和带有抗虫基因的DNA分子，并构成重组Ti质粒，那么成功导入抗虫基因的水稻胚细胞将不能在含________(填抗生素名称)的培养基上生长。

解析：(1)杀虫基因通过①～④，最终在宿主细胞内维持稳定和表达的过程叫做转化；其中①过程表示基因表达载体的构建，这是转基因抗虫水稻的核心步骤，需要的工具酶是限制性核酸内切酶(限制酶)、DNA连接酶。(2)分析图解可知，“华恢1号”的培育过程应用的主要生物技术有基因工程技术(转基因技术)、植物组织培养技术。(3)构建重组质粒时，常用Ti质粒作为载体，是因为Ti质粒上具有T-DNA，它能把目的基因整合到受体细胞(植株细胞)的染色体DNA上。(4)①启动子是一段特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，它是RNA聚合酶识别和结合的部位，有了它才能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需要的蛋白质。②从图中看出，tms基因能够编码吲哚乙酸，tmr基因能够编码细胞分裂素，这两种激素能够促进植物的生长。因此人工改造时用限制酶Ⅰ处理，其目的之一是除去或破坏质粒

上的tmr、tms，保证T-DNA进入水稻细胞后不会引起细胞的无限分裂和生长；另外只有一个插入位点，也有利于目的基因(或外源DNA)准确插入。

答案：(1)转化 ① 限制性核酸内切酶(限制酶) DNA连接酶 (2)基因工程技术(转基因技术) 植物组织培养技术 (3)染色体DNA (4)①启动子 为RNA聚合酶提供识别和结合的部位，驱动转录

②tms tmr 四环素