中国药科大学药分、药理、药剂_考研复习总结

应具备下列条件：

①与水不相混溶，沸点低，对生物碱的溶解度大，而对其它物质的溶解度应尽可能最小。 ②与生物碱或碱化试剂不起任何反应。

常用者为乙醚和氯仿，其中氯仿应用更为广泛。 提取溶剂的用量 通常应提取4次，第一次用量至少应为水液体积的一半，以后几次所用溶剂的体积应各为第一次的一半。如果水液体积很小时，第一次提取溶剂的用量则应与水液相等。 提取终点的确定

取最后一次的提取液约0.5ml，置小试管中，加盐酸或硫酸（0.1mol/L）1ml，放水浴上将有机溶剂蒸去，放冷，滴加生物碱沉淀剂（如碘化铋钾试液等）1滴，无沉淀产生，即为提取已完全。 指示剂的选择

磷酸可待因片剂分析： 酸性染料比色法

原理：在适当的pH介质中，生物碱类药物（B）可与氢离子结合成盐（BH+），一些酸性染料（如磺酸酞类的指示剂：溴麝香草酚蓝、溴甲酚绿等）在此介质中能解离为阴离子（In-），同时，阳离子和阴离子又能定量地结合成有色的离子对化合物，即离子对。 离子对被合适的有机溶剂提取后，形成有色溶液，可供比色测定。 影响定量分析的因素 1.水相的最适pH值 2.酸性染料的影响

提取完全是提取常数和酸性染料阴离子的浓度密切相关的，而提取常数的大小由是与B-的种类和有机溶剂的选择密切相关的。一般用的有甲基橙、溴麝香草酚蓝（BTB）和溴甲酚绿等。

3.有机溶剂的影响

离子对提取常数的大小还与有机溶剂的性质有关。通常有机溶剂与离子对形成氢键的能力强，则提取效率高，如氯仿和二氯甲烷等具有中等程度的提取率，并且提取的选择性也较好，为最常用的有机溶剂。 4.水分的影响

有有机溶剂提取有色的离子对时，应严防水分的混入。

5.共存物的影响：一般赋形剂，重型、酸性乙基弱碱性的物质均不干扰测定，强酸可改变染料溶液或缓冲液的pH，因而对测定有干扰。

以上五种影响因素中，水相的最适pH和有机溶剂对离子对的提取完全是酸性染料比色法的试验关键。 应用与实例 硫酸阿托品片剂 紫外分光光度法

利血平含量测定，注意避光操作。 糖类和苷类药物

单糖和双糖分子中有不对称碳原子，均具有一定的比旋度。 鉴别试验

1.灼烧试验：糖类用直火加热，先熔融膨胀，后燃烧并发生焦糖臭，遗留多量的炭。蔗糖的鉴别可应用本试验。 2.Fehling反应

单糖或含有半缩醛基的双糖分子结构中，均有醛基或酮基，都具有还原性。Fehling反应是在碱性酒石酸铜试液（Fehling试液）中，糖将铜离子还原，生成红色的氧化亚铜沉淀。 葡萄糖的鉴别可用此反应（无水葡萄糖、葡萄糖注射液、葡萄糖氯化钠注射液和莪术油葡萄糖均用Fehling反应）

蔗糖的鉴别：加硫酸煮沸，用氢氧化钠中和，再加碱性酒石酸铜试液，加热，生成氧化亚铜的红色沉淀。

葡萄糖和乳糖的杂质检查 葡萄糖的一般检查项目：酸度、氯化物和硫酸盐；溶液的澄清度与颜色；乙醇溶液的澄清度；亚硫酸盐与可溶性淀粉。

葡萄糖注射液中5-羟基糠醛的测定：紫外分光光度法。

乳糖的杂质检查：利用蛋白质类杂质遇硝酸汞试液产生的白色絮状沉淀，进行特殊杂质“蛋白质”的检查。

原料药的含量测定：葡萄糖、乳糖和蔗糖不规定含量测定，规定比旋度的范围。 制剂：葡萄糖注射液的含量测定：旋光度法。

测定中加入氨试液的作用：由于药用葡萄糖是D-葡萄糖，而D-葡萄糖有α和β两种互变异构体，因而药用葡萄糖是他们的混合物，比旋度相差甚远，而在水溶液中逐渐平衡，称作变旋。加热、加酸或加弱碱可加速平衡。 计算因素1.0426的由来： 换算为含税葡萄糖浓度（c’）时，则应为：

葡萄糖氯化钠注射液含量测定：硝酸银滴定法，每1ml硝酸银滴定液（0.1mol/L）相当于5.844mg的NaCl。

加糊精溶液以形成保护，使氯化银沉淀呈胶体状态，则具有较大的表面，有利于对指示剂的吸附，有利于滴定终点的观察。

加硼砂溶液是为了增加pH值，因为本品pH值过低，而pH值低于3.5时，则五沉淀出现。加入2.5%硼砂溶液2ml后，溶液pH值为7,可促使荧光黄电离，以增大荧光黄阴离子的有效浓度，使重点变化敏锐。 苷类药物

苷类为糖的衍生物（如氨基糖、糖醛酸等）与另一非糖有机化合物通过糖的端基碳原子连接而成的化合物。 鉴别试验：

1.Keller-Kiliani反应

α-去氧甲基五碳糖的反应

α-去氧糖类，如洋地黄毒糖和磁麻糖，是由糖类分子中与羰基相邻近的“CHOH”基失去氧，转变为“CH2”后的结构。具有较大的活泼性，由α-去氧糖与苷元结合的生成物（即苷类）容易水解。

将甾体强心苷溶于含有微量FeCl3（1滴9tCl3）的冰醋酸1～2ml中，沿管壁缓缓加入浓硫酸1～2ml，使成两液层。两液层交界面处显棕色（甲地高辛显紫色）；醋酸层显蓝色或蓝绿色，放置1h后显靛蓝色。 2.Kedde反应

苷元的不饱和内酯侧链反应。

甾体强心苷元的C17上常有α-β或β-γ的不饱和内酯，即丁烯内酯，在碱性水溶液中易与芳香硝基化合物形成有色的络合阴离子。 Kedde反应用于去乙酰毛花苷的鉴别。

加乙醇溶解后加二硝基苯甲酸试液与乙醇制氢氧化钾试液各10滴，摇匀后，溶液即显红紫

色。 3.色谱法

①纸色谱法：用于地高辛的鉴别

②薄层色谱法：用于去乙酰毛花苷及其注射液的鉴别，采用硅藻土G薄层板. ③高效液相色谱法：用于甲地高辛及其片剂的鉴别 特殊杂质的检查

药物特殊杂质允许限量检查方法

洋地黄毒苷洋地黄皂苷本品10mg溶于2ml乙醇后，加胆甾醇的醇溶液，10min内，不得发生沉淀

地高辛洋地黄毒苷6%纸色谱法

甲地高辛有关物质5%高效液相色谱法 去乙酰毛花苷有关物质10%薄层色谱法 含量测定 1.比色法：甾体强心苷元C17上的丁烯内酯部分是非常活泼的，很容易和芳香硝基化合物（如碱性三硝基苯酚试液）形成络合阴离子。所得络合物在可见光去具有特征的最大吸收峰（λmax为485～495nm）。

本法用于地高辛、去乙酰毛花苷及其注射液的含量测定 2.荧光法：利用L-抗坏血酸与过氧化氢等实际可使地高辛或洋地黄毒苷产生荧光的原理，提高了定量分析的灵敏度，从而可用于每片含主药量分别仅为0.25mg和0.1mg的片剂的含量测定。

地高辛片含量，含量均匀度（限度为20%），溶出度（限度为65%，转篮，100r/min,60min） 甲地高辛溶出度测定与地高辛一样，限度规定相同。 3.色谱法：

①柱色谱法：用于洋地黄毒苷原料药测定的纯化处理

②高效液相色谱法：用于甲地高辛及其片剂的含量测定，内标：洋地黄毒苷。 复习总结：肾上腺素类药物的结构特点

本类药物具烃氨基侧链，显弱酸性，游离碱溶于有机溶剂，其盐可溶于水；分子中具有邻苯二酚（或苯酚）结构的药物可与重金属离子络合呈色，露置空气中或遇光易氧化，色渐变深，在碱性溶液中更易变色；多数药物分子中有手性碳原子，具有光学活性；苯环上的取代基也各具特性均可供分析用。有紫外及红外吸收特性。

鉴别：三氯化铁反应。肾上腺素：翠绿色，加氨试液，显紫色→紫红色。 重酒石酸去甲肾上腺素：翠绿色，加碳酸氢钠试液，显蓝色→红色。 盐酸去氧肾上腺素：紫色。

盐酸异丙肾上腺素：深绿色，滴加新制的5%碳酸氢钠试液，显蓝色→红色。

氧化反应：盐酸异丙肾上腺素：在偏酸性条件下被碘迅速氧化，生成异丙基肾上腺素红，加硫代硫酸钠使碘的棕色消退，溶液显淡红色。

重酒石酸去甲肾上腺素：在上述条件下比较稳定，几乎不被碘氧化，需在酒石酸氢钾的饱和溶液（pH为3.56）中被碘氧化，溶液为五色或仅显微红色或淡紫色。 肾上腺素：在酸性条件下，被过氧化氢氧化后，溶液显血红色。 甲醛-硫酸反应：重酒石酸去甲肾上腺素：橙色→暗紫色。 异丙肾上腺素：污紫色。 去氧肾上腺素：污紫色。

紫外特征吸收与红外吸收光谱。

肾上腺素、重酒石酸去甲肾上腺素、盐酸去氧肾上腺素和盐酸异丙肾上腺素均需检查酮体。

紫外吸收分光光度法。酮体在310nm处有最大吸收，而药物本身在此波长处几乎没有吸收。规定：在310nm波长处测定吸收度不得大于0.05，即相当于含酮体的量低于0.06%。

含量测定：非水溶液滴定法。冰醋酸为溶剂，加入醋酸汞试液消除氢卤酸的干扰，结晶紫为指示液。

溴量法：盐酸去氧肾上腺素及其注射液采用此方法测定含量。利用药物中的苯酚结构，在酸性溶液中酚羟基邻、对位活泼氢能与过量的溴定量地发生溴代反应，再以碘量法测定剩余的溴，根据消耗的溴及硫代硫酸钠两种滴定液的量即可计算各供试品的含量。 操作要点：⑴游离溴及碘极易挥散，操作过程中必须防止逸失。 ⑵不能加入太过量的溴，否则在溴代反应中会引起酚羟基的氧化或溴化，一般加入的溴液以过量2%为宜。

⑶为了校正操作中溴及碘的可能逸失，应按平行条件进行空白试验。 氨基醚衍生物类药物分析

盐酸苯海拉明的鉴别：与硫酸反应显色。初显黄色，随即变成橙红色；滴加水，即成白色乳浊液。

水解反应。本品水溶液遇酸易水解，生成水溶性很小的二苯基甲醇，分散在水层，呈白色乳浊，加热煮沸数分钟，聚集呈油状液体，放冷，凝成白色蜡状。 与硝酸银反应形成沉淀。

紫外特吸收和红外特征吸收光谱。

盐酸苯海拉明的含量测定：非水溶液滴定法。盐酸苯海拉明原料药为盐酸盐，在冰醋酸中加醋酸汞后，可定量地与高氯酸生成苯海拉明该氯酸盐。

酸性染料比色法。主要用于盐酸苯海拉明片剂的含量测定及片剂溶出度的测定。 阴离子表面活性剂滴定法。用于盐酸苯海拉明注射液的含量测定。 此方法还可测定生物碱、含氮杂环、季铵盐类。

溶剂：水、氯仿、稀硫酸，指示液：二甲基黄-溶剂蓝19混合指示液，滴定液：磺基丁二酸钠二辛酯试液。

注意：盐酸苯海拉明含量测定：原料：非水溶液滴定法。片剂含量及溶出度：酸性染料比色法。注射液：阴离子表面活性剂滴定法。 复习总结：维生素A醋酸酯

等吸收法：在λ1的左右各选一点为λ2和λ3,使Aλ2=Aλ3=6/7Aλ1。维生素A醇。 ③杂质吸收：对维生素A的测定有影响的杂质主要有：

维生素A2和维生素A3；维生素A的氧化产物（环氧化物、维生素A醛和维生素A酸）；维生素A在光照下产生的无生物活性的聚合物鲸醇；维生素A的异构体；合成时产生的中间体。

④测定方法：第一法（使用于维生素A醋酸酯）

取维生素A醋酸酯，精密称定，加环己烷制成每1ml中含9～15单位的溶液。然后在300、316、328、340、360nm五个波长处分别测定吸收值，确定最大吸收波长（应为328nm）。计算各波长下的吸收度与328nm波长下的吸收度的比值。 计算：

a.求吸收系数，吸收系数＝A/cl。 b.求效价（U/g），U/g＝吸收系数×1900

1900为维生素A醋酸酯在环己烷溶液中测定的换算因数。 3.求维生素A醋酸酯胶丸为标示量的百分含量。

标示量%＝（A×D×1900×W）/（W×100×l×标示量） 1U=0.344μg维生素A醋酸酯