第七章_微生物的遗传变异

（四） 原生质体融合 1. 原生质体融合

通过人为的方法，使遗传性状不同的两个细胞的原生质体进行融合，借以获得具有双亲遗传性状的稳定重组子的过程，称为原生质体融合。所获得的重组子叫融合子。

2. 能进行原生质体融合的生物种类

原核生物和各种真核微生物和高等植物细胞。 3. 主要操作步骤

（1） 选选择亲本细胞置于等渗溶液中； （2） 用适当的脱壁酶除去细胞壁；

（3） 将原生质体离心聚集，加入促融合剂PEG（聚乙二醇）；

（4） 用等渗溶液稀释；

（5） 涂在能促细胞壁再生和进行细胞分裂的基本培养基上；

（6） 用影印平板法将形成的菌落接种到各种选择性培养基平板上，检验其是否为稳定的重组子；

（7） 测定其有关生物学性状和生产性能。 二、 真核微生物的基因重组

方式很多，主要有：有性杂交、准性杂交、原生质体融合、转化等。

（一） 有性杂交

杂交是指在细胞水平上进行的一种遗传重组方式。 1. 有性杂交

指不同遗传型的两个性细胞间发生的接合和随之进行的染色体重组，进而产生新遗传后代的一种育种技术。

2. 可进行有性杂交的微生物

凡能产生有性孢子的酵母菌、霉菌、蕈菌都可经有性杂交方式育种。

3. 主要操作步骤（以Saccharomyces cerevisiae为例） （1） 选择亲本：不同性状的甲、乙两个亲本。 （2） 获得单倍体细胞组成的菌落；

（2n）细胞 产孢培养基 子囊 水洗 破碎子囊 离心 （n）孢子 涂布平板 （n细胞组成的菌落）

（3） 产生出种种双倍体的有性杂交后代

把来自不同亲本、不同性别的单倍体细胞通过离心等方式使之密切地接触，以产生出种种双倍体的有性杂交后代。

甲

离心密集接触 （2n）有性杂交后代 优良性状的杂种 筛选 乙

（4） 通过筛选，选到优良性状的杂种 （二） 准性杂交 1. 准性生殖

是在自然条件下，同种而不同菌株真核微生物体细胞间的一种自发性的原生质体融合现象，它可不借减数分裂而导致低频率基因重组并产生重组子。它在某些真菌尤其是还没